Guía del usuario del software de solución de normalización de BIOSENSORES dinámicos

Para obtener orientación específica sobre la potencia de excitación y la concentración de la solución de normalización, consulte la Tabla 2 proporcionada en el manual del usuario. Tenga en cuenta que es posible que se requiera cierta optimización en función de los sistemas individuales.

Preguntas frecuentes

P: ¿Cómo debo almacenar la helicidad?
- A: Guarde heliXcyto según la información de almacenamiento proporcionada en el manual del usuario. Asegúrese de comprobar la fecha de caducidad en la etiqueta y úsela antes de que caduque.
P: ¿Se puede utilizar la helicidad con fines clínicos?
- A: No, heliXcyto es solo para uso en investigación y no debe usarse para diagnóstico o tratamiento clínico.

Características principales

Para la normalización de las señales fluorescentes en los puntos 1 y 2 de un chip heliXcyto

Permite una referencia correcta en tiempo real de las señales fluorescentes rojas durante las mediciones RT-IC
Compatible con todos los chips de helicidad
La solución de normalización (tinte rojo) contiene un tinte rojo moderadamente hidrófilo con una única carga neta positiva.

Descripción del Producto

Número de orden: NOR-Ra

Tabla 1. Contenido e información de almacenamiento

Material	Tapa	Acción concentrada	Cantidad	Almacenamiento
Normalización solución-Ra	Naranja	10 µM	6x 100 µL	-20 °C

Sólo para uso en investigación.
Este producto tiene una vida útil limitada, consulte la fecha de caducidad en la etiqueta.

Preparación

Utilice esta solución de normalización de tinte rojo para mediciones RT-IC en el canal rojo (dependiendo de la etiqueta del analito).

Diluir la solución madre de normalización de 10 μM a una concentración de trabajo con un tampón en ejecución.
La concentración de la solución de normalización debe corresponder aproximadamente a la concentración de fluoróforo en la concentración más alta del analito a medir.

Esto se puede calcular usando la siguiente ecuación:

: Concentración de la solución de normalización en el color deseado.
: Concentración de colorante en la solución del analito marcado
: Concentración más alta de analito que debe medirse
: Grado de etiquetado (relación de colorante a analito)

Las soluciones diluidas se pueden almacenar a 2-8°C hasta por 7 días.

Nota de aplicación

En la medición RT-IC, la señal fluorescente de la solución de normalización debe estar en un rango similar al de la señal más alta proveniente del analito unido (datos sin procesar). La señal fluorescente absoluta depende de la concentración de la solución de normalización y de la potencia de excitación aplicada en la medición. La potencia de excitación debe seleccionarse en función de los siguientes parámetros:

a. Concentración de fluoróforo en solución de analito:
- La concentración de fluoróforo depende de la concentración del analito utilizado en la medición, así como del grado de marcaje del analito. Para DOL alto y concentraciones altas de analito, es posible que sea necesario reducir la potencia de excitación.
b. Señal de enlace esperada:
- Los objetivos altamente expresados en una célula pueden unirse a más moléculas del analito marcado. En el caso de dianas altamente sobreexpresadas, se puede esperar una fuerte señal de unión. Para evitar el cierre de la persiana, se podría considerar reducir la potencia de excitación.
C. Tipo de chip:
- Los distintos tipos de chips tienen distintos fondos fluorescentes. Cuanto más grandes sean las trampas y más trampas haya en el chip, mayor será la señal de fondo. Por lo tanto, los chips L5 pueden requerir una potencia de excitación menor que la aplicada a los chips M5.

Para un punto de partida del poder y la norma de excitación. Para la concentración de la solución que se utilizará en un experimento RT-IC, consulte la Tabla 2. Tabla 2. Relación de la concentración de fluoróforo, la concentración de la solución de normalización y la potencia de excitación adecuada para un chip heliXcyto M5

Concentración de colorante analito. = contras del analito x DOL	Potencia de excitación	Solución de normalización de concentración.	Solución de normalización de dilución
25 nm	0.5	25 nm	1:400
50 nm	0.3	50 nm	1:200
100 nm	0.2	100 nm	1:100
300 nm	0.1	300 nm	1:33
500 nm	0.08	500 nm	1:20
1 µM	0.05	1 µM	1:10
2.5 µM	0.02	2.5 µM	1:4

Nota: Esta tabla es para su orientación. Sin embargo, la señal final registrada en la helicidad depende de muchos factores. Por lo tanto, será necesaria cierta optimización para cada sistema.

Contacto

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Calle Perchtinger. 8/10
81379 Múnich
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300 Centro de Comercio, Suite 1400
Woburn, MA 01801
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Información del pedido pedido@dynamic-biosensors.com.
Apoyo técnico soporte@dynamic-biosensors.com.
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Los instrumentos y chips se diseñan y fabrican en Alemania.
NOR-Ra v1.0
www.dynamic-biosensors.com.
Biosensores dinámicos GmbH & Inc.
NOR-Ra v1.0

Documentos / Recursos

Software de solución de normalización de BIOSENSORES dinámicos [pdf] Guía del usuario
NOR-Ra, Software de solución de normalización, Software de solución, Software

Referencias

Manual de usuario

Software de solución de normalización de BIOSENSORES dinámicos

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