ഒലിങ്ക് ടാർഗെറ്റ് 48 ടെസ്റ്റ് കിറ്റ്

ഹ്രസ്വ നിർദ്ദേശങ്ങൾ

ഇൻകുബേഷൻ

താഴെയുള്ള പട്ടിക പ്രകാരം ഒരു മൈക്രോസെൻട്രിഫ്യൂജ് ട്യൂബിൽ ഇൻകുബേഷൻ മിക്സ് തയ്യാറാക്കുക.

ഓരോ ½ 96 കിണർ പ്ലേറ്റിലും ഇൻകുബേഷൻ മിശ്രിതം (μL)

• Olink® 1-48 plex ഇൻകുബേഷൻ സൊല്യൂഷൻ 168
• Olink® Target 48 Frw-probes 21
• Olink® Target 48 Rev-probes 21
• ആകെ 210

1. ഇൻകുബേഷൻ മിക്‌സ് വോർടെക്‌സ് ചെയ്ത് സ്‌പിൻ ഡൗൺ ചെയ്യുക. ഒരു പുതിയ 23-കിണർ സ്ട്രിപ്പിലെ ഓരോ കിണറിലേക്കും ഇൻകുബേഷൻ മിശ്രിതത്തിന്റെ 8 μL കൈമാറ്റം ചെയ്യുക.
2. റിവേഴ്സ് പൈപ്പറ്റിംഗ് വഴി 3 കിണർ പ്ലേറ്റിന്റെ ആദ്യത്തെ 6 നിരകളിലെ ഓരോ കിണറിലേക്കും 96 μL ഇൻകുബേഷൻ മിക്സ് മാറ്റി പ്ലേറ്റിന് ഇൻകുബേഷൻ പ്ലേറ്റ് എന്ന് പേരിടുക.
3. ഓരോ സെയുടെയും 1 μL ചേർക്കുകampഒരു മൾട്ടി-ചാനൽ പൈപ്പറ്റ് ഉപയോഗിച്ച് കിണറിന്റെ അടിയിലേക്ക്, 1 μl എസ്ample മൂന്ന് മുകളിലെ കിണറുകളിലേക്കുള്ള നിയന്ത്രണം (മഞ്ഞ), രണ്ട് കിണറുകളിലേക്ക് 1 μL നെഗറ്റീവ് കൺട്രോൾ (ചുവപ്പ്), 1 μL കാലിബ്രേറ്ററുകൾ മൂന്ന് കിണറുകളിലേക്ക് (പച്ച), പ്ലേറ്റ് ലേഔട്ട് അനുസരിച്ച്.
4. ഒരു പശ പ്ലാസ്റ്റിക് ഫിലിം ഉപയോഗിച്ച് പ്ലേറ്റ് അടയ്ക്കുക, 400 - 1000 xg, 1 മിനിറ്റ് ഊഷ്മാവിൽ സ്പിൻ ചെയ്യുക. +4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ രാത്രി മുഴുവൻ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്യുക.
5. PEA സൊല്യൂഷൻ രാത്രിയിൽ +4 ഡിഗ്രി സെൽഷ്യസിൽ ഉരുകുക, രാത്രി മുഴുവൻ ഊഷ്മാവിൽ PEA എൻഹാൻസർ സ്ഥാപിക്കുക.

വിപുലീകരണം

ചുവടെയുള്ള പട്ടിക പ്രകാരം ഒരു എക്സ്റ്റൻഷൻ മിക്സ് തയ്യാറാക്കുക.

ഓരോ ½ 96-കിണർ പ്ലേറ്റിനും (μL) വിപുലീകരണ മിശ്രിതം

• ഉയർന്ന ശുദ്ധജലം (+4 °C) 4350
• Olink® 1-48 plex PEA Enhancer 580
• Olink® 1-48 plex PEA സൊല്യൂഷൻ 580
• Olink® 1-48 plex PEA എൻസൈം 58
• ആകെ 5 568

1. ഇൻകുബേഷൻ പ്ലേറ്റ് റൂം ടെമ്പറേച്ചറിലേക്ക് കൊണ്ടുവരിക, 400 - 1000 xg യിൽ 1 മിനിറ്റ് കറക്കുക. പിസിആർ മെഷീൻ പ്രീഹീറ്റ് ചെയ്യുക.
2. എക്സ്റ്റൻഷൻ മിക്‌സ് വോർട്ടക്സ് ചെയ്ത് ഒരു മൾട്ടിചാനൽ പൈപ്പറ്റ് റിസർവോയറിലേക്ക് ഒഴിക്കുക.
3. 5 മിനിറ്റ് ടൈമർ ആരംഭിച്ച് റിവേഴ്സ് പൈപ്പറ്റിംഗ് ഉപയോഗിച്ച് ഇൻകുബേഷൻ പ്ലേറ്റിന്റെ കിണർ ഭിത്തികളുടെ മുകൾ ഭാഗത്തേക്ക് 96 μL എക്സ്റ്റൻഷൻ മിക്സ് കൈമാറുക.
4. ഒരു പുതിയ പശയുള്ള പ്ലാസ്റ്റിക് ഫിലിം ഉപയോഗിച്ച് പ്ലേറ്റ് അടയ്ക്കുക, 2000 ആർപിഎമ്മിൽ 30 സെക്കൻഡ് നേരത്തേക്ക് പ്ലേറ്റ് വോർട്ടെക്സ് ചെയ്യാൻ MixMate® ഉപയോഗിക്കുക, എല്ലാ കിണറുകളും മിക്സഡ് ആണെന്ന് ഉറപ്പാക്കുകയും താഴേക്ക് കറങ്ങുകയും ചെയ്യുക.
5. ഇൻകുബേഷൻ പ്ലേറ്റ് തെർമൽ സൈക്ലറിൽ സ്ഥാപിച്ച് PEA പ്രോഗ്രാം ആരംഭിക്കുക. (50 °C 20 മിനിറ്റ്, 95 °C 5 മിനിറ്റ് (95 °C 30 സെക്കൻഡ്, 54 °C 1 മിനിറ്റ്, 60 °C 1 മിനിറ്റ്) x 17, 10 °C ഹോൾഡ്)

കണ്ടെത്തൽ

1. പ്രോട്ടീൻ എക്‌സ്‌പ്രഷനായി ഒരു Olink® 48.48 IFC തയ്യാറാക്കി പ്രൈം ചെയ്യുക. ചുരുക്കത്തിൽ, ചിപ്പിലെ ഓരോ അക്യുമുലേറ്ററിലേക്കും ഒരു കൺട്രോൾ ലൈൻ ഫ്ലൂയിഡ് സിറിഞ്ച് കുത്തിവയ്ക്കുക, IFC-യുടെ അടിയിൽ നിന്ന് സംരക്ഷിത ഫിലിം നീക്കം ചെയ്യുക, തുടർന്ന് ഇൻസ്ട്രുമെന്റ് സ്‌ക്രീനിലെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ പാലിച്ച് Olink® Signature Q100-ൽ IFC പ്രൈം ചെയ്യുക.
2. പ്രൈമർ പ്ലേറ്റ് ഉരുകുക, ചുഴലിക്കാറ്റ് ചുരുക്കി കറങ്ങുക.
3. ചുവടെയുള്ള പട്ടിക പ്രകാരം ഒരു ഡിറ്റക്ഷൻ മിക്സ് തയ്യാറാക്കുക.
   ഓരോ ½ 96-കിണർ പ്ലേറ്റിലും (μL) കണ്ടെത്തൽ മിശ്രിതം
   1. Olink® 1-48 plex ഡിറ്റക്ഷൻ സൊല്യൂഷൻ 275.0
   2. ഉയർന്ന ശുദ്ധജലം 116.0
   3. Olink® 1-48 plex ഡിറ്റക്ഷൻ എൻസൈം 3.9
   4. Olink® 1-48 plex PCR പോളിമറേസ് 1.5
   5. ആകെ 396.4
4. ഡിറ്റക്ഷൻ മിക്‌സ് വോർടെക്‌സ് ചെയ്ത് ഹ്രസ്വമായി കറക്കുക, 46 കിണർ സ്ട്രിപ്പിലെ ഓരോ കിണറിലും 8 μL മിക്സ് ചേർക്കുക.
5. 7.2 μL ഡിറ്റക്ഷൻ മിക്‌സ് 1-6 കോളത്തിലെ ഓരോ കിണറിലേക്കും ഒരു പുതിയ 96 കിണർ പ്ലേറ്റിലേക്ക് റിവേഴ്‌സ് പൈപ്പറ്റിംഗ് വഴി കൈമാറുക, അതിന് എസ് എന്ന് പേരിടുകampലെ പ്ലേറ്റ്.
6. തെർമൽ സൈക്ലറിൽ നിന്ന് ഇൻകുബേഷൻ പ്ലേറ്റ് നീക്കം ചെയ്യുക, ഉള്ളടക്കം സ്പിന്നുചെയ്ത് 2.8 μL എസ്-ലേക്ക് മാറ്റുകampലീ പ്ലേറ്റ്, ഫോർവേഡ് പൈപ്പിംഗ് ഉപയോഗിച്ച്.
7. 400 - 1000 xg, 1 മിനിറ്റ് ഊഷ്മാവിൽ ഒരു പശ ഫിലിം, വോർടെക്സ്, സ്പിൻ എന്നിവ ഉപയോഗിച്ച് പ്ലേറ്റ് അടയ്ക്കുക.
8. പ്രൈമർ പ്ലേറ്റിന്റെ 5-1 കോളത്തിലെ ഓരോ കിണറ്റിൽ നിന്നും 6 μL ഉം S ന്റെ 5-1 കോളത്തിലെ ഓരോ കിണറിൽ നിന്നും 6 μL ഉം കൈമാറുകamp48.48 IFC ഇടത്, വലത് ഇൻലെറ്റുകളിലേക്ക് യഥാക്രമം പ്ലേറ്റ് ചെയ്യുക. റിവേഴ്സ് പൈപ്പറ്റിംഗ് ഉപയോഗിക്കുക, ഓരോ പ്രൈമറിനും ശേഷം ടിപ്പുകൾ മാറ്റുകample. പ്രവേശന കവാടങ്ങളൊന്നും ശൂന്യമാക്കരുത്.
9. കുമിളകൾ നീക്കം ചെയ്‌ത് Olink Signature Q100-ൽ IFC ലോഡുചെയ്‌ത് ഇൻസ്ട്രുമെന്റ് സ്‌ക്രീനിലെ നിർദ്ദേശങ്ങൾ പാലിക്കുക.
10. Olink Signature Q100-ൽ IFC പ്രവർത്തിപ്പിക്കുക.

www.olink.com
© 2023 Olink Proteomics AB. Olink ഉൽപ്പന്നങ്ങളും സേവനങ്ങളും ഗവേഷണ ഉപയോഗത്തിന് മാത്രമുള്ളതാണ്, ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് നടപടിക്രമങ്ങളിൽ ഉപയോഗിക്കാനുള്ളതല്ല. ഈ പ്രമാണത്തിലെ എല്ലാ വിവരങ്ങളും അറിയിപ്പ് കൂടാതെ മാറ്റത്തിന് വിധേയമാണ്. അത്തരം വാറന്റികളും പ്രാതിനിധ്യങ്ങളും കൂടാതെ/അല്ലെങ്കിൽ ശുപാർശകളും വ്യക്തമായി പ്രസ്താവിച്ചിട്ടില്ലെങ്കിൽ, ഏതെങ്കിലും തരത്തിലുള്ള വാറന്റികൾ, പ്രാതിനിധ്യങ്ങൾ കൂടാതെ/അല്ലെങ്കിൽ ഏതെങ്കിലും തരത്തിലുള്ള ശുപാർശകൾ അറിയിക്കാൻ ഈ പ്രമാണം ഉദ്ദേശിച്ചിട്ടില്ല. ഈ ഡോക്യുമെന്റിനെ അടിസ്ഥാനമാക്കി ഒരു ഭാവി വായനക്കാരന്റെ പ്രവർത്തനങ്ങളിൽ നിന്ന് ഉണ്ടാകുന്ന ഒരു ബാധ്യതയും Olink ഏറ്റെടുക്കുന്നില്ല. OLINK ഉം Olink ലോഗോടൈപ്പും Olink Proteomics AB മുഖേന രജിസ്റ്റർ ചെയ്ത വ്യാപാരമുദ്രകളാണ്, അല്ലെങ്കിൽ രജിസ്ട്രേഷൻ തീർച്ചപ്പെടുത്തിയിട്ടില്ല. എല്ലാ മൂന്നാം കക്ഷി വ്യാപാരമുദ്രകളും അവയുടെ ഉടമസ്ഥരുടെ സ്വത്താണ്. ഒലിങ്ക് ഉൽപ്പന്നങ്ങളും വിശകലന രീതികളും നിരവധി പേറ്റന്റുകളും പേറ്റന്റ് ആപ്ലിക്കേഷനുകളും ഉൾക്കൊള്ളുന്നു https://www.olink.com/patents/. Olink Proteomics, Dag Hamarskjölds väg 52B , SE-752 37 Uppsala, Sweden 1126, v1.3, 2023-01-18

പ്രമാണങ്ങൾ / വിഭവങ്ങൾ

ഒലിങ്ക് ടാർഗെറ്റ് 48 ടെസ്റ്റ് കിറ്റ് [pdf] നിർദ്ദേശങ്ങൾ ടാർഗെറ്റ് 48, ടെസ്റ്റ് കിറ്റ്, ടാർഗെറ്റ് 48 ടെസ്റ്റ് കിറ്റ്

റഫറൻസുകൾ

• ഉപയോക്തൃ മാനുവൽ