د اولینک هدف 48 ټیسټ کټ

لنډې لارښوونې

انکیوبیشن

د لاندې جدول مطابق په مایکرو سینټرفیوج ټیوب کې د انکیوبیشن مخلوط چمتو کړئ.

انکیوبیشن مکس فی ½96 څاه پلیټ (μL)

• Olink® 1-48 plex Incubation Solution 168
• Olink® هدف 48 Frw-probes 21
• Olink® هدف 48 Rev-probes 21
• ټولټال ۱

1. د انکیوبیشن مخلوط وورټیکس او سپن کړئ. د نوي 23 څاه پټې هرې څاه ته د انکیوبیشن مخلوط 8 μL انتقال کړئ.
2. د 3 μL انکیوبیشن مکس د 6 څاه پلیټ د لومړیو 96 کالمونو هر څاه ته د ریورس پایپټینګ په واسطه انتقال کړئ او د پلیټ انکیوبیشن پلیټ نوم ورکړئ.
3. د هر s 1 μL اضافه کړئampد څاه لاندې ته د څو چینل پایپټ په کارولو سره، 1 μl Sampد پلیټ ترتیب سره سم د دریو پورتنیو څاګانو (ژیړ) کنټرول ، دوه څاګانو ته 1 μL منفي کنټرول (سرخ) او 1 μL کیلیبریټر دریو څاګانو (شین) ته.
4. پلیټ د چپکونکي پلاستيکي فلم سره مهر کړئ، په 400 - 1000 xg، 1 دقیقې د خونې په حرارت کې. د شپې په +4 سانتي ګراد کې انبار کړئ.
5. د PEA محلول د شپې په +4 سانتي ګراد کې وخورئ، او د شپې په اوږدو کې د خونې د حرارت درجه کې د PEA Enhancer ځای ونیسئ.

تمدید

د لاندې جدول مطابق د تمدید مخلوط چمتو کړئ.

د تمدید مخلوط په هر ½ 96 څاه پلیټ (μL)

• لوړ پاکوالی اوبه (+4 °C) 4350
• Olink® 1-48 plex PEA Enhancer 580
• Olink® 1-48 plex PEA حل 580
• Olink® 1-48 plex PEA انزایم 58
• ټولټال 5 568 XNUMX.

1. د انکیوبیشن پلیټ د خونې تودوخې ته راوړئ، د 400 دقیقې لپاره په 1000 - 1 xg کې وخورئ. د PCR ماشین مخکې ګرم کړئ.
2. د ایکسټینشن مخلوط وورټیکس کړئ او په ملټي چینل پایپټ زیرمه کې یې واچوئ.
3. د 5 دقیقو لپاره ټایمر پیل کړئ او د 96 μL توسیع مخلوط د انکیوبیشن پلیټ د څاه دیوالونو پورتنۍ برخې ته د ریورس پایپټینګ په کارولو سره انتقال کړئ.
4. پلیټ د نوي چپکونکي پلاستيکي فلم سره مهر کړئ، د 2000 ثانیو لپاره په 30 rpm کې د پلیټ د څرخولو لپاره MixMate® وکاروئ، ډاډ ترلاسه کړئ چې ټولې څاګانې مخلوط شوي، او ښکته شوي.
5. د انکیوبیشن پلیټ په حرارتي سایکلر کې ځای په ځای کړئ او د PEA برنامه پیل کړئ. (50 °C 20 دقیقې، 95 °C 5 دقیقې (95 °C 30 ثانیې، 54 °C 1 دقیقې، 60 °C 1 دقیقې) x 17، 10 °C ساتل)

کشف

1. د پروټین بیان لپاره Olink® 48.48 IFC چمتو او پری کړئ. په لنډه توګه، په چپ کې په هر جمع کونکي کې د کنټرول لاین مایع سرنج داخل کړئ، محافظتي فلم د IFC له ښکته څخه لرې کړئ او بیا IFC د Olink® لاسلیک Q100 کې د آلې په سکرین کې لارښوونې تعقیب کړئ.
2. پریمر پلیټ وغورځئ، ورټیکس او په لنډ ډول تودوخه کړئ.
3. د لاندې جدول مطابق د کشف مخلوط چمتو کړئ.
   په هر ½ 96 څاه پلیټ کې کشف مخلوط (μL)
   1. Olink® 1-48 plex کشف حل 275.0
   2. لوړ پاکې اوبه 116.0
   3. Olink® 1-48 plex کشف انزایم 3.9
   4. Olink® 1-48 plex PCR Polymerase 1.5
   5. ټولټال ۱
4. د کشف مخلوط وورټیکس کړئ او په لنډه توګه وخورئ او د 46 څاه پټې هرې څاه ته 8 μL مخلوط اضافه کړئ.
5. د کشف مخلوط 7.2 μL د 1-6 کالم هرې څاه ته په نوي 96 څاه پلیټ کې د ریورس پایپټینګ په واسطه انتقال کړئ او ورته S نوم ورکړئ.ampلی پلیټ.
6. د حرارتي سایکلر څخه د انکیوبیشن پلیټ لرې کړئ ، مینځپانګه وخورئ او 2.8 μL S ته انتقال کړئampلی پلیټ، د مخکینۍ پایپټینګ په کارولو سره.
7. پلیټ د چپکونکي فلم سره مهر کړئ، ورټیکس او دواړه په 400 - 1000 xg، 1 دقیقې د خونې په حرارت کې.
8. د پرائمر پلیټ د 5-1 کالم له هرې څاه څخه 6 μL او د S کالم 5-1 هرې څاه څخه 6 μL انتقال کړئampپه ترتیب سره د 48.48 IFC چپ او ښي انلیټونو کې پلیټ کړئ. ریورس پایپټینګ وکاروئ او د هر پریمر یا s وروسته لارښوونې بدل کړئample. هیڅ داخله خالي مه پریږدئ.
9. بلبلونه لرې کړئ او د Olink لاسلیک Q100 کې IFC بار کړئ او د وسیلې سکرین کې لارښوونې تعقیب کړئ.
10. د Olink لاسلیک Q100 کې IFC چل کړئ.

www.olink.com
© 2023 Olink Proteomics AB. د اولینک محصولات او خدمات یوازې د څیړنې کارونې لپاره دي نه د تشخیصي پروسیجرونو کې د کارولو لپاره. په دې سند کې ټول معلومات پرته له خبرتیا د بدلون تابع دي. دا سند د هیڅ ډول تضمینونو، نمایندګیو او/یا سپارښتنو د رسولو لپاره نه دی، پرته لدې چې دا ډول تضمینونه، نمایشونه او/یا سپارښتنې په واضح ډول بیان شوي وي. اولینک د دې سند پراساس د احتمالي لوستونکي عملونو څخه رامینځته شوي مسؤلیت په غاړه نه اخلي. OLINK او د اولین لوګوټایپ د Olink Proteomics AB لخوا راجستر شوي سوداګریزې نښې دي، یا د راجستریشن پاتې دي. د دریمې ډلې ټولې سوداګریزې نښې د دوی د اړوندو مالکینو ملکیت دی. د اولینک محصولات او د ارزونې میتودونه د ډیری پیټینټونو او پیټینټ غوښتنلیکونو لخوا پوښل شوي https://www.olink.com/patents/. Olink Proteomics, Dag Hammarskjölds väg 52B , SE-752 37 Uppsala, Sweden 1126, v1.3, 2023-01-18

اسناد / سرچینې

د اولینک هدف 48 ټیسټ کټ [pdf] لارښوونې هدف 48، ټیسټ کټ، هدف 48 ټیسټ کټ

حوالې

• د کارن لارښود