Seti ya Jaribio la Olink Target 48

Maagizo mafupi

Incubation

Tayarisha mchanganyiko wa Incubation kwenye bomba la microcentrifuge kulingana na jedwali hapa chini.

Mchanganyiko wa incubation kwa kila sahani ½ yenye visima 96 (μL)

• Olink® 1-48 plex Incubation Solution 168
• Olink® Target 48 Frw-probes 21
• Olink® Target 48 Rev-probes 21
• Jumla 210

1. Vortex na spin chini mchanganyiko wa Incubation. Hamisha 23 μL ya mchanganyiko wa Incubation kwenye kila kisima cha ukanda mpya wa visima 8.
2. Hamisha 3 μL ya mchanganyiko wa Incubation kwenye kila kisima cha safu wima 6 za kwanza za sahani yenye visima 96 kwa kupitisha bomba kinyume na ukipe jina bamba la Kuachilia.
3. Ongeza 1 μL ya kila sample kutumia bomba la njia nyingi hadi chini ya kisima, 1 μl ya Sample Udhibiti wa visima vitatu vya juu (njano), 1 μL ya Udhibiti Hasi kwa visima viwili (nyekundu), na 1 μL ya Vikalio kwa visima vitatu (kijani), kulingana na mpangilio wa sahani.
4. Funga sahani na filamu ya plastiki ya wambiso, spin saa 400 - 1000 xg, 1 min kwa joto la kawaida. Ingiza usiku kwa +4 °C.
5. Kuyeyusha Suluhisho la PEA usiku kwa +4 °C, na uweke Kiboreshaji cha PEA kwenye joto la kawaida usiku kucha.

Ugani

Tayarisha mchanganyiko wa nyongeza kulingana na jedwali hapa chini.

Mchanganyiko wa kiendelezi kwa kila sahani ½ yenye visima 96 (μL)

• Maji Safi ya Juu (+4 °C) 4350
• Olink® 1-48 plex PEA Enhancer 580
• Olink® 1-48 plex PEA Solution 580
• Olink® 1-48 plex PEA Enzyme 58
• Jumla 5 568

1. Lete Bamba la Kutokeza kwenye joto la kawaida, sogeza kwa 400 - 1000 xg kwa dakika 1. Preheat mashine ya PCR.
2. Vortex mchanganyiko wa Ugani na uimimine kwenye hifadhi ya pipette ya multichannel.
3. Anzisha kipima muda kwa dakika 5 na uhamishe 96 μL ya mchanganyiko wa Kiendelezi hadi sehemu za juu za kuta za kisima cha Bamba la Kuachilia kwa kutumia bomba la kurudi nyuma.
4. Funga sahani kwa filamu mpya ya plastiki inayonamatika, tumia MixMate® kuzungusha sahani kwa kasi ya 2000 rpm kwa sekunde 30, hakikisha kwamba visima vyote vimechanganywa, na kusokota chini.
5. Weka Bamba la Incubation kwenye kizunguko cha joto na uanze programu ya PEA. (50 °C dakika 20, 95 °C dakika 5 (95 °C sek 30, 54 °C dakika 1, 60 °C dakika 1) x 17, 10 °C kushikilia)

Ugunduzi

1. Andaa na utumie Olink® 48.48 IFC kwa Maonyesho ya Protini. Kwa ufupi, ingiza sindano ya maji ya laini moja kwenye kila kikusanyiko kwenye chip, ondoa filamu ya kinga kutoka sehemu ya chini ya IFC na kisha weka IFC kwenye Olink® Signature Q100 kwa kufuata maagizo kwenye skrini ya chombo.
2. Thibitisha Bamba la Msingi, vortex na uzungushe kwa muda mfupi.
3. Tayarisha mchanganyiko wa Utambuzi kulingana na jedwali hapa chini.
   Mchanganyiko wa utambuzi kwa kila sahani ½ yenye visima 96 (μL)
   1. Suluhisho la Utambuzi la Olink® 1-48 plex 275.0
   2. Maji Safi ya Juu 116.0
   3. Enzyme ya Utambuzi ya Olink® 1-48 plex 3.9
   4. Olink® 1-48 plex PCR Polymerase 1.5
   5. Jumla 396.4
4. Vunja mchanganyiko wa Utambuzi na usogeze kwa muda mfupi na uongeze 46 μL ya mchanganyiko kwenye kila kisima cha ukanda wa visima 8.
5. Hamisha 7.2 μL ya mchanganyiko wa Kigunduzi kwenye kila kisima cha safu wima 1-6 kwenye bati jipya la visima 96 kwa kupitisha bomba kinyume, na ukipe jina S.ample Bamba.
6. Ondoa Bamba la Kuachilia kutoka kwa kiendesha mzunguko wa joto, sogeza chini yaliyomo na uhamishe 2.8 μL hadi S.ample Bamba, kwa kutumia bomba la mbele.
7. Funga sahani na filamu ya wambiso, vortex na spin wote kwa 400 - 1000 xg, 1 min kwa joto la kawaida.
8. Hamisha 5 μL kutoka kwa kila kisima cha safu wima 1-6 ya Bamba la Msingi na 5 μL kutoka kwa kila kisima cha safu wima ya 1-6 ya S.ample Bamba kwenye viingilio vilivyowekwa alama 48.48 vya IFC vya kushoto na kulia, mtawalia. Tumia uwekaji bomba wa nyuma na ubadilishe vidokezo baada ya kila kitangulizi au sekundeample. Usiache viingilio vyovyote vikiwa tupu.
9. Ondoa viputo na upakie IFC kwenye Sahihi ya Olink Q100 na ufuate maagizo kwenye skrini ya chombo.
10. Endesha IFC kwenye Sahihi ya Olink Q100.

www.olink.com
© 2023 Olink Proteomics AB. Bidhaa na huduma za Olink ni Kwa Matumizi ya Utafiti Pekee na sio kwa Matumizi ya Taratibu za Uchunguzi. Taarifa zote katika hati hii zinaweza kubadilika bila taarifa. Hati hii haikusudiwi kuwasilisha dhamana yoyote, uwakilishi na/au mapendekezo ya aina yoyote, isipokuwa kama dhamana, uwakilishi na/au mapendekezo hayo yamesemwa wazi. Olink hachukui dhima yoyote inayotokana na vitendo vya msomaji mtarajiwa kulingana na hati hii. OLINK na aina ya nembo ya Olink ni chapa za biashara zilizosajiliwa, au zinazosubiri kusajiliwa, na Olink Proteomics AB. Alama zote za biashara za wahusika wengine ni mali ya wamiliki husika. Bidhaa za Olink na mbinu za kupima zimefunikwa na hataza kadhaa na maombi ya hataza https://www.olink.com/patents/. Olink Proteomics, Dag Hammarskjölds väg 52B , SE-752 37 Uppsala, Uswidi 1126, v1.3, 2023-01-18

Nyaraka / Rasilimali

Seti ya Jaribio la Olink Target 48 [pdf] Maagizo Lengo 48, Seti ya Mtihani, Seti 48 ya Mtihani

Marejeleo

• Mwongozo wa Mtumiaji