ថាមវន្ត BIOSENSORS heliX បូកនឹងកញ្ចប់ភ្នាក់ងារកាត់បន្ថយ 1

ថាមវន្ត BIOSENSORS heliX បូកនឹងកញ្ចប់ភ្នាក់ងារកាត់បន្ថយ 1

លក្ខណៈសំខាន់ៗ

  • អនុញ្ញាតឱ្យកាត់បន្ថយចំណង disulfide ដោយប្រើ TCEP ។
  • ឆបគ្នាជាមួយប្រូតេអ៊ីន និងអង្គបដិប្រាណ (MW> 20 kDa) ។
  • ការកាត់បន្ថយជាក់លាក់នៃអង្គបដិប្រាណ។
  • ការភ្ជាប់គ្នាភ្លាមៗនៃម៉ូលេគុលដែលកាត់បន្ថយគឺអាចធ្វើទៅបាន (សូមមើលសៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់ HK-MAL)។
  • ការកាត់បន្ថយនៃ ligands ច្រើនអាចត្រូវបានអនុវត្តក្នុងពេលតែមួយ។
  • រួមបញ្ចូលសារធាតុសម្រាប់ប្រតិកម្មកាត់បន្ថយបុគ្គលពីរ។

ការពិពណ៌នាផលិតផល

លេខបញ្ជាទិញ៖ RK-PA-1

តុ 1. មាតិកា និងព័ត៌មានផ្ទុក

សម្ភារៈ មួក ចំនួនទឹកប្រាក់ ការផ្ទុក
TCEP (500 mM) ក្រហម 2 x 20 μL -20 អង្សាសេ
កាត់បន្ថយ​សតិបណ្ដោះអាសន្ន [1] 2 x 1.8 មីលីលីត្រ -20 អង្សាសេ
ជួរឈរបង្វិលការបន្សុត ក្រហម 4 x ៦០-៧០ អង្សាសេ
បំពង់ប្រតិកម្ម 2.0 មីល្លីលីត្រ សម្រាប់ការបន្សុតជួរឈរបង្វិល 4 x RT
ឯកតាតម្រង centrifugal (10 kDa MWCO) 2 x RT
បំពង់ប្រមូលផ្តុំ centrifugation 4 x RT

សម្រាប់តែការស្រាវជ្រាវប៉ុណ្ណោះ។

ផលិតផលនេះមានអាយុកាលធ្នើមានកំណត់ សូមមើលកាលបរិច្ឆេទផុតកំណត់នៅលើស្លាក។

សំខាន់ ផលិតផលអាចត្រូវបានដឹកជញ្ជូននៅសីតុណ្ហភាពខុសៗគ្នា ប៉ុន្តែការផ្ទុកគួរតែប្រកាន់ខ្ជាប់នូវគោលការណ៍ណែនាំដែលមានចែងក្នុងតារាង។ សារធាតុរអិលជ័រនៅក្នុងជួរឈរបង្វិលបន្សុតមាន 0.02% សូដ្យូមអាហ្សីត។

សម្ភារៈបន្ថែមដែលត្រូវការ

តុ 2. សម្ភារៈបន្ថែម

សម្ភារៈ មតិយោបល់
មីក្រូកណ្តាលនៅតុ ជួរល្បឿនដែលត្រូវការពី 1,000 xg ទៅ 13,000 xg
Vortex
បំពង់ប្រតិកម្ម 1.5 មីលីលីត្រ

ដំណោះស្រាយ និងសតិបណ្ដោះអាសន្នទាំងអស់ត្រូវបានរួមបញ្ចូលនៅក្នុងកញ្ចប់។

ការកាត់បន្ថយ 3 ជំហាននៃជីវម៉ូលេគុលនៅក្នុងបំពង់ប្រតិកម្ម

សូមអានពិធីការទាំងមូលមុនពេលចាប់ផ្តើម និង អនុវត្តជំហានទាំងអស់ដោយគ្មានការរំខាន.

ជំនួយ ពិធីការនេះអាចត្រូវបានអនុវត្តក្នុងពេលដំណាលគ្នាសម្រាប់ប្រតិកម្មភ្ជាប់ជាច្រើន។

ការផ្លាស់ប្តូរ Buffer នៃប្រូតេអ៊ីន/អង្គបដិប្រាណ

  1. សើមភ្នាសអង្គភាពតម្រង centrifugal ជាមួយនឹង 100 µL កាត់បន្ថយសតិបណ្ដោះអាសន្ន។
  2. បន្ថែមប្រហែល។ 200 µg (រហូតដល់ 500 µg) នៃប្រូតេអ៊ីន/អង្គបដិបក្ខទៅអង្គភាពចម្រោះចាប់ពីជំហានទី 1។ ប្រសិនបើចាំបាច់បន្ថែមការបន្ថយសតិបណ្ដោះអាសន្នទៅក្នុងតម្រងរហូតដល់បរិមាណអតិបរមា 450 µL ត្រូវបានឈានដល់ និង centrifuge នៅ 13,000 xg (រហូតដល់ 14,000 xg) សម្រាប់ 5 នាទី ហើយបោះបង់លំហូរឆ្លងកាត់។
  3. បន្ថែម 350 µL នៃការកាត់បន្ថយ Buffer និង centrifuge នៅ 13,000 xg សម្រាប់ 5 នាទីហើយបោះបង់លំហូរម្តងទៀត។
  4. ធ្វើជំហានទី 3 ម្តងទៀត មួយដងទៀតជាមួយនឹងពេលវេលា centrifugation ចុងក្រោយ 10 នាទី ដើម្បីទទួលបានបរិមាណចុងក្រោយប្រហាក់ប្រហែល។ 80 μL
  5. ប្រមូល សample ទាំងជាមួយ pipette 100 µL ចូលទៅក្នុងបំពង់ថ្មី ឬដោយដាក់ឧបករណ៍ចម្រោះដាក់បញ្ច្រាស់ក្នុងបំពង់ centrifugal ថ្មី centrifuge រយៈពេល 2 នាទីនៅ 1000 x g ។

កាត់បន្ថយជាមួយ TCEP

  1. រៀបចំដំណោះស្រាយ 2.5 mM TCEP ក្នុងការកាត់បន្ថយ Buffer ដោយបន្ថែម 1 µL នៃ 500 mM TCEP ទៅក្នុង 199 µL កាត់បន្ថយ Buffer ។
    រៀបចំដោយផ្ទាល់មុនពេលប្រើ។
  2. បន្ថែមការបន្ថយសតិបណ្ដោះអាសន្នទៅ sample vial សម្រាប់បរិមាណសរុប 98 µL និងបន្ថែម 2 µL នៃដំណោះស្រាយ 2.5 mM TCEP ដើម្បីទទួលបានកំហាប់ចុងក្រោយនៃ 50 µM TCEP ។ លាយប្រតិកម្មដោយបំពង់ឡើងលើចុះក្រោម។
  3. ដាក់ដំណោះស្រាយនៅសីតុណ្ហភាព 37 អង្សាសេនៅ 400 rpm រយៈពេល 2 ម៉ោងដើម្បីធានាបាននូវការកាត់បន្ថយពេញលេញ។

ការបន្សុតនិងការប្រមូលផ្តុំ

  1. ធ្វើឱ្យមានលំនឹងជួរឈរបង្វិលបន្សុតចំនួនពីរ (មួកក្រហម) សម្រាប់ការលាង TCEP មួយ:
    a. ដោះគម្របបាតរបស់ជួរឈរ ហើយបន្ធូរមួក (កុំដកមួក)។
    b. ដាក់ជួរឈរក្នុងបំពង់ប្រតិកម្ម 2.0 មីលីលីត្រ។
    c. Centrifuge នៅ 1,500 × g សម្រាប់ 1 នាទីដើម្បីយកដំណោះស្រាយការផ្ទុក។
    d. បន្ថែម 400 µL នៃការកាត់បន្ថយ Buffer ទៅគ្រែជ័ររបស់ជួរឈរ។ Centrifuge នៅ 1,500 × g សម្រាប់រយៈពេល 1 នាទី ដើម្បីដកសតិបណ្ដោះអាសន្នចេញ។
    e. ធ្វើជំហាន d ម្តងទៀត ហើយបោះចោលសតិបណ្ដោះអាសន្នលទ្ធផលចេញពីបំពង់ប្រតិកម្ម។ ជួរឈរបង្វិលការបន្សុតនៅពេលនេះគួរតែស្ថិតក្នុងសភាពស្ងួត។

TCEP លាងសម្អាត

a. ដាក់ជួរឈរពីជំហានមុននៅក្នុងបំពង់ប្រតិកម្ម 1.5 មីលីលីត្រថ្មី។
b. ដោះមួកនៃជួរឈរបង្វិលលេខ 1 ហើយចាក់ s យ៉ាងឆ្ងាញ់ampលាទៅកំពូលនៃគ្រែជ័រ។
c. Centrifuge នៅ 1,500 xg សម្រាប់ 2 នាទីដើម្បីប្រមូល sampឡេ (លំហូរឆ្លងកាត់) ។ បោះបង់ជួរឈរបង្វិលបន្សុតបន្ទាប់ពីប្រើ។
d. ដោះមួកនៃជួរឈរបង្វិលលេខ 2 ហើយចាក់ sample ពីជំហានមុនទៅគ្រែជ័រ។
e. Centrifuge នៅ 1,500 xg សម្រាប់ 2 នាទីដើម្បីប្រមូល sampឡេ (លំហូរឆ្លងកាត់) ។ បោះបង់ជួរឈរបង្វិលបន្សុតបន្ទាប់ពីប្រើ។
f. ការភ្ជាប់ Thiol យោងតាមសៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់ (HK-MAL-1 ឬ HK-MAL-2) នៃការកាត់បន្ថយ sampលេអាចត្រូវបានអនុវត្ត។

ព័ត៌មានបន្ថែម

Buffer Exchange and Concentration with Centrifugal Filter Units 

  1. យកឯកតាតម្រង centrifugal មួយ បន្ថែមបរិមាណសមស្របនៃសតិបណ្ដោះអាសន្ននៅក្នុងឧបករណ៍តម្រង ហើយបិទវា។
  2. ដាក់ឧបករណ៍តម្រងដែលបិទភ្ជាប់ទៅក្នុង rotor centrifuge ដោយតម្រឹមខ្សែមួកឆ្ពោះទៅកណ្តាលនៃ rotor; តុល្យភាពជាមួយឧបករណ៍ស្រដៀងគ្នា។
  3. បង្វិលឧបករណ៍នៅ 13,000 xg (ឬ 14,000 xg) សម្រាប់ពេលវេលាដែលបានផ្តល់ឱ្យ។
  4. ដកលំហូរចេញ ហើយធ្វើជំហានទី 1-3 ម្តងទៀត។
  5. ដោះឧបករណ៍ដែលបានផ្គុំចេញពី centrifuge ហើយបំបែកឧបករណ៍ចម្រោះចេញពីបំពង់ microcentrifuge ។
  6. ដើម្បីយកឧបករណ៍ចម្រោះមកវិញ សូមដាក់ឧបករណ៍ចម្រោះដាក់បញ្ច្រាសនៅក្នុងបំពង់ centrifugal ស្អាត តម្រឹមមួកចំហរឆ្ពោះទៅកណ្តាលនៃ rotor ។ តុល្យភាពជាមួយឧបករណ៍ស្រដៀងគ្នា។ បង្វិលរយៈពេល 2 នាទីនៅ 1,000 xg ដើម្បីផ្ទេរ sample ពីឧបករណ៍ទៅបំពង់។
    ព័ត៌មានបន្ថែម

លេខលំដាប់ដែលមានប្រយោជន៍

តុ 3. លេខលំដាប់

ឈ្មោះផលិតផល ចំនួនទឹកប្រាក់ លំដាប់លេខ
ឧបករណ៍ភ្ជាប់ heliX ® Thiol 1 5 x HK-MAL-1
ឧបករណ៍ភ្ជាប់ heliX ® Thiol 2 5 x HK-MAL-2
ឯកតាតម្រង centrifugal (3 kDa MWCO) 5 កុំព្យូទ័រ។ CF-003-5
ឯកតាតម្រង centrifugal (10 kDa MWCO) 5 កុំព្យូទ័រ។ CF-010-5
10x Buffer A [2] 50 មីលីលីត្រ (ទិន្នផល 500 មីលីលីត្រ) BU-P-150-10
5x Buffer B [3] 50 មីលីលីត្រ (ទិន្នផល 250 មីលីលីត្រ) BU-P-1000-5

ទំនាក់ទំនង

ថាមវន្ត Biosensors GmbH Dynamic Biosensors, Inc
Perchtinger Str. ៨/១០ មជ្ឈមណ្ឌលពាណិជ្ជកម្ម ៣០០ ឈុត ១៤០០
81379 ទីក្រុង Munich Woburn, MA ០១៨០១
អាល្លឺម៉ង់ សហរដ្ឋអាមេរិក

ព័ត៌មានបញ្ជាទិញ order@dynamic-biosensors.com
ជំនួយបច្ចេកទេស support@dynamic-biosensors.com

  1. កាត់បន្ថយ Buffer៖ 100 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 300 mM NaCl, 5 mM EDTA, pH 7.4
  2. Buffer A៖ 50 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 150 mM NaCl, pH 7.2
  3. សតិបណ្ដោះអាសន្ន ខ៖ 50 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 1 M NaCl, pH 7.2

ជំនួយអតិថិជន

www.dynamic-biosensors.com
ឧបករណ៍ និងបន្ទះសៀគ្វីត្រូវបានវិស្វកម្ម និងផលិតនៅប្រទេសអាល្លឺម៉ង់។
©2024 Dynamic Biosensors GmbH | Dynamic Biosensors, Inc. រក្សាសិទ្ធិគ្រប់យ៉ាង។
និមិត្តសញ្ញា

ឯកសារ/ធនធាន

ថាមវន្ត BIOSENSORS heliX បូកនឹងកញ្ចប់ភ្នាក់ងារកាត់បន្ថយ 1 [pdf] សៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់
RK-PA-1, heliX plus កញ្ចប់ភ្នាក់ងារកាត់បន្ថយ 1, heliX plus, កញ្ចប់ភ្នាក់ងារកាត់បន្ថយ 1, កញ្ចប់ភ្នាក់ងារ 1, កញ្ចប់ 1

ឯកសារយោង

ទុកមតិយោបល់

អាសយដ្ឋានអ៊ីមែលរបស់អ្នកនឹងមិនត្រូវបានផ្សព្វផ្សាយទេ។ វាលដែលត្រូវការត្រូវបានសម្គាល់ *