ស្ថានីយការងារ opentrons OT-2 សម្រាប់ការណែនាំអំពីស្វ័យប្រវត្តិកម្មមន្ទីរពិសោធន៍ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព

សន្លឹករៀបចំ
ការវាស់វែង និងការវិភាគស្ថិតិ

និពន្ធដោយ Kennedy Bae, Ph.D. និង Kinnari Watson, Ph.D.

ការចាប់ផ្តើម

មុននឹងបង្រៀនផែនការមេរៀន សូមបំពេញជំហានខាងក្រោមមុនពេលចូលរៀន។

ដោះប្រអប់ OT-2
ដំឡើងកម្មវិធី Opentrons
ភ្ជាប់បំពង់
ក្រិតតាមខ្នាត
កំណត់ប្រវែងចុង និងអុហ្វសិតបំពង់
នាំចូលពិធីការដែលពាក់ព័ន្ធទៅកម្មវិធី
សាកល្បងដំណើរការពិធីការនៅលើ OT-2

ត្រូវការជំនួយបន្ថែម?

សម្រាប់ជំនួយបច្ចេកទេស សូមពិនិត្យមើលរបស់យើង។ មជ្ឈមណ្ឌលជំនួយ Opentrons សម្រាប់អត្ថបទពាក់ព័ន្ធ។ ប្រសិនបើអ្នកត្រូវការជំនួយបន្ថែម សូមទាក់ទង support@opentrons.com.

ប្រសិនបើអ្នកមានសំណួរទាក់ទងនឹងផែនការមេរៀន សូមទាក់ទងអ្នកនិពន្ធ Kennedy Bae នៅ kennedy@opentrons.comឬ Kinnari Watson នៅ kinnari@opentrons.com.

មគ្គុទ្ទេសក៍អ្នកអប់រំ
ការវាស់វែង និងការវិភាគស្ថិតិ

និពន្ធដោយ Kennedy Bae, Ph.D. និង Kinnari Watson, Ph.D.

គោលបំណង

មន្ទីរពិសោធន៍នេះមានគោលបំណងអភិវឌ្ឍការយល់ដឹងរបស់សិស្សអំពីការប្រើប្រាស់ការបំប្លែងសៀរៀលដើម្បីបង្កើតខ្សែកោងស្តង់ដារ និងការប្រើប្រាស់ខ្សែកោងស្ដង់ដារសម្រាប់ការធ្វើអន្តរកម្ម។ampតម្លៃ le ។ នេះរួមបញ្ចូលទាំងការកោតសរសើរចំពោះ៖

• ជំនាញបំពង់មូលដ្ឋាន
• ការរំលាយស៊េរី
• ការវាស់វែងចម្លង
• ជួរនៃខ្សែកោងស្តង់ដារ
• ការប្រើប្រាស់ស្ថិតិដើម្បីវាយតម្លៃសារៈសំខាន់

សិស្ស​អនុវត្ត​ការ​ដាក់​បំពង់​ដោយ​ដៃ​ស្រប​នឹង​ការ​គ្រប់គ្រង​រាវ​ដោយ​ស្វ័យ​ប្រវត្តិ ដែល​អនុញ្ញាត​ឱ្យ​សិស្ស​មើល​ឃើញ​ពី​ភាពខ្លាំង និង​ឱកាស​នៃ​បច្ចេកទេស​ទាំងពីរ។

ទស្សនិកជនសិស្ស

មន្ទីរពិសោធន៍នេះត្រូវបានរចនាឡើងសម្រាប់ប្រើប្រាស់ក្នុងការចូលរៀនថ្នាក់បរិញ្ញាបត្រជីវវិទ្យាកម្រិតមធ្យម។ វាមានភាពបត់បែនក្នុងការសម្រុះសម្រួលចំនួនសិស្សដែលបានចុះឈ្មោះក្នុងថ្នាក់។

ចំណេះដឹងផ្ទៃខាងក្រោយ

សិស្សគួរមានការយល់ដឹងអំពីគំនិតនៃការដាក់បំពង់ វិសាលគម ខ្សែកោងស្តង់ដារ និងការវិភាគស្ថិតិ។

សមត្ថភាពស្នូល

ជំនាញមន្ទីរពិសោធន៍
បំពង់, សampការរៀបចំ និងការប្រើប្រាស់ឧបករណ៍ស្វ័យប្រវត្តិកម្មមន្ទីរពិសោធន៍

ការវិភាគទិន្នន័យ
បង្កើតខ្សែកោងស្តង់ដារ អន្តរប៉ូល និងការវិភាគស្ថិតិ

ការត្រិះរិះពិចារណា
ការបកស្រាយទិន្នន័យពិសោធន៍ ការដោះស្រាយបញ្ហា និងការសន្និដ្ឋានសមហេតុផល

ការផ្គត់ផ្គង់

ពិធីការ Opentrons

ទាញយកពិធីការពី
https://protocols.opentrons.com/protocol/customizable_s erial_dilution_ot2

• ជ្រើសរើសប៉ារ៉ាម៉ែត្រខាងក្រោមនៅលើ webទំព័រយោងទៅតាមការរៀបចំ និងការផ្គត់ផ្គង់របស់អ្នក៖
  • ប្រភេទបំពង់
  • ភ្នំចំហៀង
  • ប្រភេទព័ត៌មានជំនួយ
  • ប្រភេទធុង
  • ប្រភេទចាន
• រក្សាការកំណត់លំនាំដើមសម្រាប់៖
  • កត្តារលាយ (3)
  • ចំនួននៃការរំលាយ (10)
  • បរិមាណលាយសរុប (150)
  • ទទេនៅក្នុងចានអណ្តូង (បាទ)
  • យុទ្ធសាស្ត្រប្រើគន្លឹះ (ប្រើព័ត៌មានជំនួយមួយ)
  • បរិមាណនៃគម្លាតខ្យល់ (10)

ឧបករណ៍ Opentrons

Opentrons OT-2 មនុស្សយន្តគ្រប់គ្រងវត្ថុរាវដោយស្វ័យប្រវត្តិ
Opentrons p300 8-channel pipette

ឧបករណ៍មិនបើក

ឧបករណ៍វាស់ស្ទង់ spectrophotometer ផ្អែកលើចាន
កម្មវិធីសម្រាប់ការវិភាគទិន្នន័យ (ឧ. Excel ឬកម្មវិធីស្ថិតិដែលខិតខំប្រឹងប្រែង)
P1000 បរិមាណអថេរបំពង់ដោយដៃ (មួយក្នុងមួយសិស្ស)
P100 បរិមាណអថេរបំពង់ដោយដៃ (ត្រូវការតែមួយប៉ុណ្ណោះសម្រាប់បង្ហាញផ្នែក A)

ផ្នែកទន់

Opentrons 300 μL Tip Rack
១២-អណ្តូង
96-អណ្តូងទឹក ចានបាត
បំពង់សាកល្បង (6 ក្នុងមួយសិស្ស)
Dropper (1 ក្នុងសិស្ស)

សារធាតុប្រតិកម្ម

1000 មីលីលីត្រ diH20 សម្រាប់សិស្សម្នាក់
FD&C Blue លេខ 1 (McCormick® ត្រូវបានប្រើក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍មន្ទីរពិសោធន៍នេះ)

រយៈពេលសាកល្បង

វគ្គថ្នាក់ដែលត្រូវការ
1

ពេលវេលាដំណើរការមន្ទីរពិសោធន៍
ពេលវេលាសរុបប៉ាន់ស្មាន៖ ២.៥-៣ ម៉ោង។
ការណែនាំ និងការក្រិតតាមខ្នាត ការបង្កើតខ្សែកោង៖ 35 នាទី។
Sample ការរៀបចំ និងដាក់បំពង់៖ ១ ម៉ោង។
ការប្រមូលទិន្នន័យ៖ ៣០ នាទី។

ការដោះស្រាយបញ្ហាជាមូលដ្ឋាន

1. ធ្វើការសាកល្បងមុនថ្នាក់; វិធីនេះ រាល់ការកើតឡើងដែលមិននឹកស្មានដល់អាចត្រូវបានដោះស្រាយ មុនពេលសិស្សមកដល់។
2. បញ្ហា​ជាមួយ​នឹង​គន្លឹះ​ដែល​ធ្វើ​ឲ្យ​ស្លាក​ស្នាម​ត្រូវ​បាន​គេ​ប្រើ​ស្ទើរតែ​គ្រប់​ពេល​ដោយសារ​ការ​ប្រើ​ឧបករណ៍​ពិសោធន៍​ជំនួស​ឬ​ការ​ក្រិត​មនុស្ស​យន្ត។ ប្រសិនបើអ្នកជួបប្រទះបញ្ហានេះ ហើយបានបញ្ជាក់ពី labware ត្រឹមត្រូវ សូមសាកល្បងធ្វើក្រិតមនុស្សយន្តឡើងវិញ។
3. ប្រសិនបើអ្នកត្រូវការទាក់ទងទៅផ្នែកជំនួយ Opentron សូមប្រាប់ពួកគេថាអ្នកគឺជាផ្នែកនៃកម្មវិធី Opentrons សម្រាប់ការអប់រំរបស់យើង និងកាលបរិច្ឆេទនៃថ្នាក់មន្ទីរពិសោធន៍បន្ទាប់របស់អ្នក។

សកម្មភាពមុនបន្ទប់ពិសោធន៍ដែលត្រូវការ

មុនពេលចាប់ផ្តើមមន្ទីរពិសោធន៍នេះ សិស្សានុសិស្សគួរមានសមត្ថភាពបច្ចេកទេស និងចំណេះដឹងទ្រឹស្តីដូចខាងក្រោម៖

• ផ្ទុកចុងបំពង់ដាក់លើបំពង់បង្ហូរដោយដៃ
• ការលៃតម្រូវកម្រិតសំឡេងសម្រាប់ pipettes ដោយដៃ
• ចំណេះដឹងទ្រឹស្ដីនៃ spectrophotometerry - អ្នកអប់រំនឹងកំពុងដំណើរការ spectrophotometer សម្រាប់មន្ទីរពិសោធន៍នេះ
• ការយល់ដឹងអំពីខ្សែកោងស្តង់ដារ រួមទាំងចំណេះដឹងអំពីសមីការដែលកំណត់ខ្សែកោង និងសមត្ថភាពក្នុងការបញ្ចូលតម្លៃ
• ការយល់យ៉ាងរឹងមាំនៃការវិភាគស្ថិតិជាមូលដ្ឋាន រួមទាំងការគណនា និងការបកស្រាយមធ្យោបាយ គម្លាតស្តង់ដារ និង R²

ការណែនាំអំពីនីតិវិធី

1. ការណែនាំអំពីមន្ទីរពិសោធន៍ ~ 15 នាទី។

តាមឧត្ដមគតិ សិស្សគួរអានការណែនាំពីមន្ទីរពិសោធន៍មុននឹងមកថ្នាក់រៀន ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ គ្រោងចំណាយពេល 10 នាទីដើម្បីពិភាក្សាអំពីបច្ចេកទេសបំពង់បង្ហូរប្រេង។view នៃខ្សែកោងស្តង់ដារ និង interpolating sampតម្លៃ le ។

2. Calibration Curve Generation ~ 20 នាទី។

បន្ទាប់មក បង្ហាញពីការបង្កើតខ្សែកោងស្តង់ដារ (ផ្នែក A) សម្រាប់ថ្នាក់ (មន្ទីរពិសោធន៍នេះសន្មត់ថាអ្នកអប់រំនឹងក្លាយជាប្រតិបត្តិករតែមួយគត់នៃមនុស្សយន្ត OT-2 និង spectrophotometer)៖

1. រៀបចំសូលុយស្យុងពណ៌ខៀវជាមួយថ្នាំពណ៌អាហារពណ៌ខៀវ 50 μL និង 10 mL នៃ diH2O ។
2. បន្ថែម 200 μL នៃដំណោះស្រាយជ្រលក់ពណ៌ខៀវទៅក្នុងអណ្តូង A1-H1 នៃចានបាត 96-អណ្តូង។
3. បន្ថែមទឹក 20 មីលីលីត្រទៅក្នុងអណ្តូង A1 នៃអាងស្តុកទឹក។
   (ចំណាំ៖ ជួរ​ឈរ​បន្ទាប់​ពី​ការ​រំលាយ​ចុងក្រោយ​គឺ​ជា​ទីតាំង​លំនាំដើម​នៃ​ចន្លោះ​ទទេ។ អណ្ដូង​ចុងក្រោយ​នៃ​រណ្ដៅ/អាង​ស្តុក​ទឹក​គឺ​ជា​សំរាម​រាវ​លំនាំដើម។​)
4. រៀបចំ labware ដូចខាងក្រោមៈ
   ក. រន្ធ 1 = Opentrons 300 μL ប្រដាប់ដាក់គន្លឹះ
   ខ. រន្ធ 2 = អាងស្តុកទឹក 12 ឆានែល
   គ. រន្ធ 3 = 96- ចានបាតរាបស្មើ
5. បន្តទៅកម្មវិធីដំណើរការ OT-2 ដើម្បីដំណើរការពិធីការ។
6. កំណត់បរិមាណនៃការស្រូបយកចានអណ្តូង 96 នៅ 450 nm ។

3. ការពិភាក្សា ~ 5 នាទី។

បន្ទាប់ពីដំណើរការការរំលាយតាមសៀរៀល និងបង្កើតខ្សែកោងស្តង់ដារ អ្នកប្រហែលជាចង់ត្រលប់មកជាមួយគ្នាជាថ្នាក់ ហើយពិភាក្សាអំពីភាពខ្លាំង និងឱកាសនៃស្វ័យប្រវត្តិកម្ម។

4. ផ្នែក B: សៀវភៅដៃ Sample ការរៀបចំ ~ 1 ម៉ោង។

ក្នុងអំឡុងពេលនៃផ្នែកនៃមន្ទីរពិសោធន៍នេះ សិស្សនឹងត្រូវបានស្នើសុំឱ្យបំពេញផ្នែក B នៃមន្ទីរពិសោធន៍ដោយឯករាជ្យ៖

1. ប្រើបំពង់សាកល្បងមួយដើម្បីប្រមូល 200 μL aliquot នៃសារធាតុជ្រលក់ប្រមូលផ្តុំ។
2. ប្រើបំពង់សាកល្បងទីពីរដើម្បីប្រមូល 4 មីលីលីត្រនៃសារធាតុរំលាយ (diH2O) ។
3. Pipette យ៉ាងហោចណាស់ 800 μL នៃ diH20 ទៅក្នុងបំពង់នីមួយៗក្នុងចំណោម 4 បំពង់ដែលនៅសល់។ ទាំងនេះនឹងក្លាយទៅជារបស់អ្នក។amples ។
4. ប្រើដំណក់ទឹកដើម្បីចែកចាយបរិមាណផ្សេងៗគ្នានៃសារធាតុជ្រលក់ដែលប្រមូលផ្តុំទៅក្នុង s នីមួយៗampបំពង់។
5. Pipette 200 μL នៃ s ដំបូងរបស់អ្នក។ampចូលទៅក្នុងអណ្តូងនៃចាន 96 ។ ធ្វើម្តងទៀតនេះ 3 ដងទៀតដើម្បីឱ្យអ្នកមានការចម្លង 4 របស់នោះ។ample នៅក្នុង 4 អណ្តូងនៃចាន។ សរសេរថាអណ្តូងណាដែលអ្នកដាក់ sample into (អ្នកទំនងជានឹងកំពុងចែករំលែកចានអណ្តូង 96 របស់អ្នកជាមួយសិស្សផ្សេងទៀត – អ្នកចង់ដឹងថាតើ samples ជារបស់អ្នក!)
6. ធ្វើជំហានខាងលើម្តងទៀតសម្រាប់ 3 វិនាទីដែលនៅសល់របស់អ្នក។amples ។ អ្នកគួរតែ 4 អណ្តូងនៃ s នីមួយៗample សម្រាប់អណ្តូងសរុបចំនួន 16 ដែលបានបំពេញនៅក្នុងចាន 96 អណ្តូង។
7. កំណត់បរិមាណនៃការស្រូបយកចានអណ្តូង 96 នៅ 450 nm ។

ខណៈពេលដែលសិស្សបញ្ចប់ផ្នែក B គ្រោងនឹងធ្វើចរាចរជុំវិញមន្ទីរពិសោធន៍ដើម្បីឆ្លើយសំណួរ និងសង្កេតមើលបច្ចេកទេសបំពង់ទឹករបស់សិស្ស ដោយរំលឹកសិស្សឱ្យកត់ត្រានូវអណ្តូងណាមួយដែលពួកគេកំពុងប្រើប្រាស់ និងផ្តល់ជំនួយជាបុគ្គលតាមតម្រូវការ។

5. ការប្រមូលទិន្នន័យ ~ 30 នាទី។

ទុកពេល 30 នាទីសម្រាប់ការប្រមូលទិន្នន័យ។

6. ការបំបែក ~ 10 នាទី។

ទុកពេលនៅចុងបញ្ចប់នៃមន្ទីរពិសោធន៍ ដើម្បីណែនាំរបាយការណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ដោយសង្ខេប និងផ្តល់ឱ្យសិស្សនូវពេលវេលាគ្រប់គ្រាន់ដើម្បីសម្អាតស្ថានីយរបស់ពួកគេ និងសួរសំណួរដែលនៅសល់។

របាយការណ៍មន្ទីរពិសោធន៍

សេចក្តីណែនាំ

ចាត់តាំងសិស្សឱ្យរៀបចំរបាយការណ៍មន្ទីរពិសោធន៍ដ៏ទូលំទូលាយមួយ ដែលរួមបញ្ចូលទិន្នន័យខ្សែកោងការក្រិតតាមខ្នាត, interpolated sampតម្លៃ le និងការវិភាគស្ថិតិ។ ផ្តល់ការណែនាំសម្រាប់រចនាសម្ព័ន្ធរបាយការណ៍ និងការបង្ហាញទិន្នន័យ។ គំនិតមួយចំនួនសម្រាប់ការរុករកមានដូចខាងក្រោម។

• បង្កើតខ្សែកោងស្តង់ដារ
  • សរុបតម្លៃបុគ្គលសម្រាប់ស្តង់ដាររបស់អ្នក។
  • ស្វែងរកមធ្យម និងគម្លាតស្តង់ដារក្នុងនីមួយៗ។
  • ប្រើតម្លៃមធ្យមដើម្បីកំណត់ខ្សែកោងស្តង់ដារ។
  • កំណត់ថាតើខ្សែកោងដែលបានគណនាសមនឹងចំណុចទិន្នន័យដោយគណនាតម្លៃ R2 បានល្អប៉ុណ្ណា។ សូមចាំថាបន្ទាត់ដែលសមនឹងចំណុចទិន្នន័យយ៉ាងល្អឥតខ្ចោះមានតម្លៃ R2 នៃ 1 ។ វាមានសារៈសំខាន់ណាស់ក្នុងការបង្កើតខ្សែកោងស្តង់ដារថ្មីជាមួយនឹងតម្លៃ R2 ដែលបានគណនាសម្រាប់ការពិសោធន៍នីមួយៗ។
• ការបកស្រាយរបស់ Sample តម្លៃ
  • ប្រើខ្សែកោងស្តង់ដារដែលបានគណនារបស់អ្នកដើម្បីបញ្ចូល sample តម្លៃដោយដៃ។
  • តើអ្វីជាគម្លាតស្តង់ដាររវាងការចម្លងនៃ s នីមួយៗរបស់អ្នក។amples?
  • តើ​មាន​ហេតុផល​អ្វី​ខ្លះ​ដែល​អាច​ធ្វើ​ឱ្យ​មាន​ភាព​ខុស​គ្នា​នេះ?
  • តើការវាស់វែងចម្លងមានអត្ថប្រយោជន៍អ្វីខ្លះ?
• តើនិន្នាការអ្វីខ្លះដែលអ្នកអាចសង្កេតបានក្នុងចំណោមឈុតផ្សេងៗគ្នានៃ samples? តើភាពខុសគ្នាដែលបានសង្កេតឃើញមានសារសំខាន់តាមស្ថិតិទេ?
  • តើ​មាន​អ្នក​ចេញ​ក្រៅ​ទេ? តើការប្រើប្រាស់ស្ថិតិអនុញ្ញាតឱ្យមានការវាយតម្លៃលើទិន្នន័យខាងក្រៅធៀបនឹងទិន្នន័យជ្រើសរើស cherry យ៉ាងដូចម្តេច?

មគ្គុទ្ទេសក៍សិស្ស
ការវាស់វែង និងការវិភាគស្ថិតិ

គោលបំណង

មន្ទីរពិសោធន៍នេះនឹងអភិវឌ្ឍការយល់ដឹងរបស់អ្នកអំពីការប្រើប្រាស់ការបំប្លែងសៀរៀលដើម្បីបង្កើតខ្សែកោងស្តង់ដារ និងការប្រើប្រាស់ខ្សែកោងស្ដង់ដារសម្រាប់ការបញ្ចូល sampតម្លៃ le ។ នេះរួមបញ្ចូលទាំងការកោតសរសើរចំពោះ៖

• ជំនាញបំពង់មូលដ្ឋាន
• ការរំលាយស៊េរី
• ការវាស់វែងចម្លង
• ជួរនៃខ្សែកោងស្តង់ដារ
• ការប្រើប្រាស់ស្ថិតិដើម្បីវាយតម្លៃសារៈសំខាន់

នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍នេះ សិស្សនឹងប្រើប្រាស់ទិន្នន័យដែលទទួលបានដោយការបង្ហូរដោយដៃ ក៏ដូចជាឧបករណ៍ដោះស្រាយរាវស្វ័យប្រវត្តិ OT-2 ដែលអនុញ្ញាតឱ្យសិស្សមើលឃើញពីភាពខ្លាំង និងឱកាសនៃបច្ចេកទេសទាំងពីរ។

បរិក្ខារដែលត្រូវការ

• Opentrons OT-2 មនុស្សយន្តគ្រប់គ្រងវត្ថុរាវដោយស្វ័យប្រវត្តិ
• Opentrons p300 8-channel pipette
• Opentrons 300 μL Tip Rack
• បំពង់បង្ហូរទឹកដោយដៃ (P1000)
• ១២-អណ្តូង
• 96-អណ្តូងទឹក ចានបាត
• 1000 មីលីលីត្រ ទឹក deionized (diH2O)
• FD&C Blue លេខ 1 (McCormick® ត្រូវបានប្រើក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍មន្ទីរពិសោធន៍នេះ)
• 6 បំពង់សាកល្បង
• ដំណក់ទឹក

នីតិវិធីពិសោធន៍

ផ្នែក A៖ សង្កេត ការបង្កើតខ្សែកោងស្តង់ដារ

OT-2 នឹងដំណើរការបំពង់បង្ហូរដោយស្វ័យប្រវត្តិនៃការរំលាយសៀរៀល។ នៅពេលដែលអ្នកអប់រំរបស់អ្នកវាស់ស្តង់ដារទាំងនេះជាមួយនឹងឧបករណ៍វាស់ស្ទង់ spectrophotometer ពួកគេនឹងអាចបង្កើតខ្សែកោងស្តង់ដារមួយ។

អ្នកអប់រំរបស់អ្នកនឹងធ្វើតាមការណែនាំទាំងនេះ ដើម្បីរៀបចំ និងដំណើរការមនុស្សយន្ត OT-2។ ជំហាន 1-4 នឹងត្រូវបានបញ្ចប់ដោយដៃ (ដោយអ្នកអប់រំ ឬសិស្សស្ម័គ្រចិត្តរបស់អ្នក) មុនពេលដំណើរការជំហានមនុស្សយន្ត OT-2 ស្វ័យប្រវត្តិ៖

1. រៀបចំសូលុយស្យុងពណ៌ខៀវជាមួយថ្នាំពណ៌អាហារពណ៌ខៀវ 50 μL និង 10 mL នៃ diH2O ។
2. បន្ថែម 200 μL នៃសូលុយស្យុងពណ៌ខៀវទៅអណ្តូង A1-H1 នៃចានបាត 96-អណ្តូង។
3. បន្ថែមទឹក 20 mL ទៅក្នុងអណ្តូង A1 នៃអាងស្តុកទឹក។

(ចំណាំ៖ ជួរ​ឈរ​បន្ទាប់​ពី​ការ​រំលាយ​ចុងក្រោយ​គឺ​ជា​ទីតាំង​លំនាំដើម​នៃ​ចន្លោះ​ទទេ។ អណ្ដូង​ចុងក្រោយ​នៃ​រណ្ដៅ/អាង​ស្តុក​ទឹក​គឺ​ជា​សំរាម​រាវ​លំនាំដើម។​)

4. រៀបចំ labware ដូចខាងក្រោម:

ο រន្ធទី 1 = Opentrons 300 μL tip rack
ο រន្ធ 2 = អាងស្តុកទឹក 12 ឆានែល
ο រន្ធ 3 = ចានបាតរាបស្មើ 96 អណ្តូង

5. បន្តទៅកម្មវិធីដំណើរការ OT-2 ដើម្បីដំណើរការពិធីការស្វ័យប្រវត្តិ។

ο ទាញយកពិធីការពី
https://protocols.opentrons.com/protocol/customiza ble_serial_dilution_ot2

• ជ្រើសរើសប៉ារ៉ាម៉ែត្រខាងក្រោមនៅលើ webទំព័រយោងទៅតាមការរៀបចំ និងការផ្គត់ផ្គង់របស់អ្នក៖
  • ប្រភេទបំពង់
  • ភ្នំចំហៀង
  • ប្រភេទព័ត៌មានជំនួយ
  • ប្រភេទធុង
  • ប្រភេទចាន
• រក្សាការកំណត់លំនាំដើមសម្រាប់៖
  • កត្តារលាយ (3)
  • ចំនួននៃការរំលាយ (10)
  • បរិមាណលាយសរុប (150)
  • ទទេនៅក្នុងចានអណ្តូង (បាទ)
  • យុទ្ធសាស្ត្រប្រើគន្លឹះ (ប្រើព័ត៌មានជំនួយមួយ)
  • បរិមាណនៃគម្លាតខ្យល់ (10)

6. កំណត់បរិមាណនៃការស្រូបយកចានអណ្តូង 96 នៅ 450 nm ។

Note: Serial dilutions are performed by sequentially transferring aliquots of a standard into increasing amounts of diluent (see diagram). The OT-2 will aspirate an aliquot of the concentrated standards and dispense it into the diluent. It will then mix the concentrated dye and the diluent by repeatedly pipetting the liquid up and down. Then the robot will aspirate an aliquot of the first mixed standard and dispense it into the next column of diluent.

ផ្នែក B៖ ការប្រព្រឹត្ត សៀវភៅណែនាំ Sample ការរៀបចំ

1. ប្រើបំពង់សាកល្បងមួយដើម្បីប្រមូល 200 μL aliquot នៃសារធាតុជ្រលក់ប្រមូលផ្តុំ។
2. ប្រើបំពង់សាកល្បងទីពីរដើម្បីប្រមូល 4 មីលីលីត្រនៃសារធាតុរំលាយ (diH2O) ។
3. Pipette យ៉ាងហោចណាស់ 800 μL នៃ diH20 ទៅក្នុងបំពង់នីមួយៗក្នុងចំណោម 4 បំពង់ដែលនៅសល់។ ទាំងនេះនឹងក្លាយទៅជារបស់អ្នក។amples ។
4. ការបង្កើត samples ជាមួយនឹងបរិមាណផ្សេងគ្នានៃការផ្តោតអារម្មណ៍ធៀបនឹង diluent៖ ប្រើ dropper ដើម្បីចែកចាយបរិមាណផ្សេងគ្នានៃសារធាតុជ្រលក់ដែលប្រមូលផ្តុំទៅក្នុង s នីមួយៗampបំពង់។
5. Pipette 200 μL នៃ s ដំបូងរបស់អ្នក។ampចូលទៅក្នុងអណ្តូងនៃចាន 96 ។ ធ្វើម្តងទៀតនេះ 3 ដងទៀតដើម្បីឱ្យអ្នកមានការចម្លង 4 របស់នោះ។ample នៅក្នុង 4 អណ្តូងនៃចាន។ សរសេរថាអណ្តូងណាដែលអ្នកដាក់ sample into (អ្នកទំនងជាកំពុងចែករំលែកចានអណ្តូង 96 របស់អ្នកជាមួយសិស្សផ្សេងទៀតដែលអ្នកចង់ដឹងថា samples ជារបស់អ្នក!)
6. ធ្វើជំហានទី 5 និង 6 ម្តងទៀតសម្រាប់ 3 វិនាទីដែលនៅសល់របស់អ្នក។amples ដូច្នេះអ្នកបញ្ចប់ដោយ 4 ចម្លងនៃ s នីមួយៗample ក្នុង 4 អណ្តូង។ អ្នកគួរតែ 4 អណ្តូងនៃ s នីមួយៗample សម្រាប់អណ្តូងសរុបចំនួន 16 ដែលបានបំពេញនៅក្នុងចាន 96 អណ្តូង។
7. កំណត់បរិមាណនៃការស្រូបយកចានអណ្តូង 96 នៅ 450 nm ។

សំណួរសិស្ស
ការវាស់វែង និងការវិភាគស្ថិតិ

សំណួរសិស្ស

1. តើ​ការ​ប្រើ​ការ​រំលាយ​សៀរៀល​ដើម្បី​បង្កើត​ខ្សែកោង​ស្ដង់ដារ​មាន​អត្ថប្រយោជន៍​អ្វី​ខ្លះ?
2. ហេតុអ្វី​បាន​ជា​ជំនាន់​នៃ​ការ​ក្រិត​ខ្នាត​មាន​សារៈសំខាន់​ក្នុង​ការ​វាស់វែង​ជីវសាស្ត្រ?
3. ដាក់ឈ្មោះបញ្ហាប្រឈមដ៏មានសក្តានុពលមួយក្នុងការបង្កើតខ្សែកោងការក្រិតតាមខ្នាត និងស្នើដំណោះស្រាយ។
4. ពិពណ៌នាអំពីតួនាទីរបស់ឧបករណ៍ដែលបានប្រើនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍នេះ។
5. តើអ្វីជាប្រភពទូទៅនៃភាពប្រែប្រួលពីការដាក់បំពង់ដោយដៃ?
6. ហេតុអ្វីបានជាវាមានប្រយោជន៍ក្នុងការវាស់ស្ទង់ការចម្លងនៃ s នីមួយៗampលេ?
7. តើអ្វីទៅជាគោលបំណងនៃការ interpolating sampតើតម្លៃនៅក្នុងការពិសោធន៍នេះ?
8. តើការវិភាគស្ថិតិអាចជួយបកស្រាយភាពខុសគ្នាក្នុងចំណោម samples?
9. តើការរកឃើញពីមន្ទីរពិសោធន៍នេះអាចពាក់ព័ន្ធសម្រាប់ការស្រាវជ្រាវជីវសាស្រ្តយ៉ាងដូចម្តេច?

ឯកសារ/ធនធាន

ស្ថានីយការងារ opentrons OT-2 សម្រាប់ស្វ័យប្រវត្តិកម្មមន្ទីរពិសោធន៍ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព [pdf] សេចក្តីណែនាំ ស្ថានីយការងារ OT-2 សម្រាប់ស្វ័យប្រវត្តិកម្មមន្ទីរពិសោធន៍ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព OT-2 ស្ថានីយការងារសម្រាប់ស្វ័យប្រវត្តិកម្មមន្ទីរពិសោធន៍ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព ស្វ័យប្រវត្តិកម្មមន្ទីរពិសោធន៍ប្រកបដោយប្រសិទ្ធភាព ស្វ័យប្រវត្តិកម្មមន្ទីរពិសោធន៍ ស្វ័យប្រវត្តិកម្ម

ឯកសារយោង

• សៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់