qEVORIGINAL Gen 2 ជួរឈរ
ការណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់
សម្រាប់ qEVORIGINAL Gen 2 COLUMNS (35 nm & 70 nm)

មគ្គុទ្ទេសក៍ចាប់ផ្តើមរហ័សនេះផ្តល់នូវការណែនាំប្រតិបត្តិការទូទៅ។
សម្រាប់ព័ត៌មានលម្អិត អ្នកអាចទាញយកបណ្ណាល័យពេញលេញនៃសៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់ qEV និងធនធានផ្សេងទៀតពីគេហទំព័រជំនួយ Izon នៅ support.izon.com

សន្លឹកទិន្នន័យសុវត្ថិភាពអាចរកបាននៅ support.izon.com/safety-datasheets

មានបំណងប្រើ

ជួរឈរ qEV ញែក vesicles ក្រៅកោសិកាចេញពីជីវសាស្រ្តamples និងត្រូវបានបំពាក់ដោយបន្ទះសៀគ្វី RFID សម្រាប់ប្រើជាមួយ Automatic Fraction Collector (AFC)។
បន្ទះសៀគ្វីទាំងនេះនឹងមិនប៉ះពាល់ដល់ការប្រើប្រាស់ដោយដៃទេ។

ជួរឈរ qEV មានបំណងប្រើប្រាស់នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ស្រាវជ្រាវដោយបុគ្គលិកជំនាញសម្រាប់តែការប្រើប្រាស់ស្រាវជ្រាវប៉ុណ្ណោះ។ ជួរឈរ qEV មិនត្រូវបានបម្រុងទុកសម្រាប់គោលបំណងវិនិច្ឆ័យទេ ហើយមិនគួរប្រើដើម្បីធ្វើការសម្រេចចិត្តព្យាបាលទេ។

អនុសាសន៍ប្រតិបត្តិការ

1. centrifuge samples មុនពេលផ្ទុកជួរឈរដើម្បីលុបកោសិកា និងកំទេចកំទីកោសិកាធំ។ ដំបូង centrifuge នៅ 1,500 xg សម្រាប់រយៈពេល 10 នាទី ដើម្បីយកកោសិកា និងភាគល្អិតធំៗចេញ។ បញ្ចូលកណ្តាលឡើងវិញនូវ supernatant នៅ 10,000 xg រយៈពេល 10 នាទី។
2. សម្រាប់ទំហំធំ samples, វាគឺអាចធ្វើទៅបានដើម្បីប្រមូលផ្តុំ sample មុនពេលផ្ទុកវានៅលើជួរឈរ qEV ។ នេះមិនអាចអនុវត្តចំពោះសេរ៉ូម និងប្លាស្មា s បានទេ។amples ដែលមានកម្រិតខ្ពស់នៃប្រូតេអ៊ីន។ Izon ណែនាំឱ្យប្រើឧបករណ៍ប្រមូលផ្តុំ Merck Millipore និងតម្រង Amicon® Ultra Centrifugal ។
3. Izon ណែនាំឱ្យប្រើជួរឈរតែមួយ ប្រសិនបើអ្នកមានបំណងវិភាគ vesicles សម្រាប់អាស៊ីត nucleic ។
4. ធានាថា សample buffer គឺនៅសីតុណ្ហភាពដូចគ្នាទៅនឹងជួរឈរ (និយមចន្លោះពី 18-24 ˚C)។
5. ប្រើតែសតិបណ្ដោះអាសន្ន (0.22 µm) ដែលត្រងថ្មីៗ ដើម្បីជៀសវាងការចម្លងរោគ។

ការណែនាំអំពីប្រតិបត្តិការ

qEV1 ភាពជាក់លាក់នៃជួរឈរ

Sampកម្រិតផ្ទុក	≤ 1 .0 មីលីលីត្រ
បរិមាណជួរឈរ	13.5 មីលីលីត្រ
កម្រិតសំឡេងសតិបណ្ដោះអាសន្ន	4.0 មីលីលីត្រ
ទំហំប្រភាគល្អបំផុត	0.7 មីលីលីត្រ
ត្រូវការសតិបណ្ដោះអាសន្នក្នុងមួយវិនាទីampការប្រមូល le	10.0 មីលីលីត្រ

លំនឹង

1. លំនឹងជួរឈរ និង sample buffer ស្ថិតនៅក្នុងជួរសីតុណ្ហភាពប្រតិបត្តិការ 18-24 ˚C។ កុំដកមួកជួររហូតដល់ជួរសីតុណ្ហភាពប្រតិបត្តិការត្រូវបានឈានដល់។
2. យកមួកខាងលើចេញដោយប្រុងប្រយ័ត្ន។
3. ភ្ជាប់​ជួរ​ឈរ​ក្នុង​ទីតាំង​ត្រង់​ទៅ​កន្លែង​ឈរ​ដែល​រួចរាល់​សម្រាប់​ប្រើប្រាស់។ qEV Racks និងអ្នកប្រមូលប្រភាគដោយស្វ័យប្រវត្តិអាចរកបានពី Izon Science ។
4. ភ្ជាប់អាងស្តុកទឹកជួរឈរប្រសិនបើមាន ហើយបញ្ចូលទឹកប្រាក់ជាមួយសតិបណ្ដោះអាសន្ន។

COLUMN FLUSHING

1. ដោះគម្របបាត ហើយអនុញ្ញាតឱ្យសតិបណ្ដោះអាសន្នចាប់ផ្តើមដំណើរការតាមរយៈជួរឈរ។
2. បង្ហូរ​ជួរ​ឈរ​ដោយ​មាន​កម្រិត​សំឡេង​ជួរ​ឈរ​យ៉ាង​ហោច​ណាស់​មួយ​នៃ​សតិបណ្ដោះ​អាសន្ន។ ប្រសិនបើកម្មវិធីខាងក្រោមរបស់អ្នកត្រូវបានប៉ះពាល់ដោយសារធាតុសូដ្យូមអាហ្សីត សូមលាងសម្អាតជាមួយនឹងបរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្នយ៉ាងហោចណាស់ 2 ជួរ។ ប្រសិនបើសតិបណ្ដោះអាសន្ន elution មួយក្រៅពី PBS នឹងត្រូវប្រើ ធ្វើឱ្យមានលំនឹងជួរឈរជាមួយនឹងបរិមាណជួរឈរយ៉ាងហោចណាស់ 3 នៃសតិបណ្ដោះអាសន្នថ្មី។ ជួរឈរនឹងឈប់ហូរដោយស្វ័យប្រវត្តិ នៅពេលដែល buffers ទាំងអស់បានចូលទៅក្នុង frit កំពុងផ្ទុក។

សៀវភៅណែនាំ SAMPការប្រមូល LE

1. ត្រងឬ centrifuge ជីវសាស្រ្ត sampលេដើម្បីយកភាគល្អិតធំ។
   យោងលើអនុសាសន៍ប្រតិបត្តិការខាងលើ។
2. នៅពេលដែលសតិបណ្ដោះអាសន្នបានឈប់ហូរចូលទៅក្នុងជួរឈរពីការហូរចេញ ផ្ទុក centrifuged s ដែលបានរៀបចំ។ampកម្រិតសំឡេងនៅលើ frit ផ្ទុក។
   ជៀសវាងការបញ្ឈប់លំហូរជួរឈរក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការក្នុងរយៈពេលយូរ ដើម្បីធានាបាននូវការបំបែក EV ត្រឹមត្រូវ។
3. ភ្លាមចាប់ផ្តើមប្រមូលបរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្ន 1 (នេះរួមបញ្ចូលទាំងបរិមាណដែលបានផ្លាស់ទីលំនៅដោយការផ្ទុក sampលេ) ។
4. អនុញ្ញាតឱ្យ សample ដើម្បីរត់ចូលទៅក្នុងជួរឈរ។ ជួរឈរនឹងឈប់ហូរនៅពេលដែល s ទាំងអស់។amples បានចូលទៅក្នុង frit ផ្ទុក។
5. បញ្ចូលទឹកប្រាក់ក្នុងអាងស្តុកទឹក/ជួរឈរដោយប្រើសតិបណ្ដោះអាសន្ន ហើយបន្តប្រមូលបរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្ន។
   ដើម្បីប្រមូលបរិមាណត្រឹមត្រូវ ផ្ទុកតែបរិមាណដែលត្រូវការទៅផ្នែកខាងលើនៃជួរឈរ រង់ចាំឱ្យកម្រិតសំឡេងដំណើរការរហូតដល់លំហូរឈប់ ហើយធ្វើម្តងទៀត។ 
6. នៅពេលដែលបរិមាណសតិបណ្ដោះអាសន្នត្រូវបានប្រមូល សូមបន្តប្រមូលបរិមាណប្រមូលបរិសុទ្ធ (PCV)2 ។ សូមមើលរូបភាពទី 1 និងទី 2 ។

ជួរឈរ FLUSH និងការផ្ទុក

1. បនា្ទាប់ពីបរិមាណដែលចង់បានត្រូវបានប្រមូលរួច បញ្ចោញជួរឈរដោយ 8.5 mL នៃ 0.5 M Sodium Hydroxide (NaOH) បន្តដោយ 17 mL នៃ buffer មុនពេលផ្ទុក s ផ្សេងទៀតampលេ
2. ប្រសិនបើ​រក្សាទុក​ជួរឈរ​សម្រាប់​ការ​ប្រើប្រាស់​នាពេល​អនាគត សូម​លាង​សម្អាត​ជាមួយ​នឹង​សតិបណ្ដោះអាសន្ន​ដែលមាន​ភ្នាក់ងារ​បាក់តេរី (ឧទាហរណ៍ 0.05% w/v sodium azide) ឬ 20% អេតាណុល។
3. ជួរឈរអាចត្រូវបានរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់បន្ទាប់ពីការប្រើប្រាស់ដោយផ្តល់ឱ្យពួកគេត្រូវបានសម្អាតដោយយោងតាមការណែនាំខាងលើ។ ប្រសិនបើដំណោះស្រាយសមស្របមិនមានទេនោះជួរឈរអាចត្រូវបានរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាព 4-8 ˚C បន្ទាប់ពីការប្រើប្រាស់។

¹កម្រិតសំឡេងសតិបណ្ដោះអាសន្ន – កម្រិតសំឡេងនៃសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលលាតសន្ធឹងពីជួរមុនភាគល្អិតនៃចំណាប់អារម្មណ៍។
²Purified Collection Volume (PCV) – បរិមាណដែលបានបន្សុតដោយជួរឈរដែលមានភាគល្អិតនៃការចាប់អារម្មណ៍។
សូមមើលសៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់ពេញលេញសម្រាប់ព័ត៌មានទាក់ទងនឹងការជ្រើសរើស PCV ដែលសមស្រប។

រូបភាពទី 1. ធម្មតា elution profile សម្រាប់ជួរឈរ qEV1 35 nm ដែលមាន 1.0 mL នៃប្លាស្មារបស់មនុស្សផ្ទុក; ប្រូតេអ៊ីន elute ក្នុងបរិមាណក្រោយជាង vesicles ។ កំហាប់ vesicle ត្រូវបានវាស់ដោយប្រើ Exoid និងកម្រិតប្រូតេអ៊ីនដោយការវិភាគ BCA ។

EV និងភាគល្អិតដែលមានទំហំប្រហាក់ប្រហែលគ្នា។
កម្រិតប្រូតេអ៊ីន

រូបភាពទី 2. ការប្រៀបធៀបប្រូតេអ៊ីន និង EV elution profiles រវាង qEV1 35 nm និង qEV1 70 nm ។ ជួរ​ឈរ​ដែល​បាន​គូស​បញ្ជាក់​គឺ​ជា​តម្លៃ​ទ្រឹស្តី​ដែល​ផ្អែក​លើ​ការ​រួម​បញ្ចូល​គ្នា​មួយ​ampការវាស់វែង។

qEV/35 EVs និងភាគល្អិតដែលមានទំហំស្រដៀងគ្នា
កម្រិតប្រូតេអ៊ីន qEV/35
qEV/70 EVs និងភាគល្អិតដែលមានទំហំស្រដៀងគ្នា
កម្រិតប្រូតេអ៊ីន qEV/70

www.izon.com

ឯកសារ/ធនធាន

ជួរឈរ IZON qEV1 [pdf] ការណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់ qEV1 Columns, qEV1, Columns

ឯកសារយោង

• សៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់