ថាមវន្ត BIOSENSORS Y-Structure Amine Coupling Kit 1

លក្ខណៈសំខាន់ៗ

• Allows for coupling of biomolecules with primary amines (e.g. NH2-terminus, lysines) to the new Y-structure Ligand strand 1 – Red.
• គីមីវិទ្យាស្តង់ដារងាយស្រួល (NHS គីមីវិទ្យា) ។
• ឆបគ្នាជាមួយបន្ទះឈីបអាដាប់ធ័រ heliX®។
• ឆបគ្នាជាមួយការបន្សុតproFIRE®សម្រាប់ការភ្ជាប់ ligand-DNA សុទ្ធ (> 5 kDa) ។
• ការភ្ជាប់នៃ ligands ច្រើនអាចត្រូវបានអនុវត្តក្នុងពេលដំណាលគ្នា។
• ទិន្នផល > 95% សុទ្ធ ligand-DNA រួមបញ្ចូលគ្នាជាមួយនឹងគុណភាពកំណត់របស់អ្នកប្រើនៃផលិតផលចុងក្រោយ។
• Includes reagents for three individual conjugation reactions (approx. 10-50 regenerations each; up to max. 500).
• ឆបគ្នាជាមួយដំណើរការបង្កើតឡើងវិញតាមស្តង់ដារស្វ័យប្រវត្តិ។

លំហូរការងារលើសview

លំហូរការងារការភ្ជាប់ 3 ជំហាន

បន្ទាត់ពេលវេលា៖ Hands on time < 1 h | ការភ្ញាស់ ~ 2 h | សរុប ~ 3 ម៉ោង។

ការពិពណ៌នាផលិតផល

លេខបញ្ជាទិញ៖ HK-NYS-NHS-1
តារាង 1. មាតិកា និងព័ត៌មានផ្ទុក

សម្ភារៈ	មួក	ចំនួនទឹកប្រាក់	ការផ្ទុក
Y-structure ខ្សែលីហ្គែន ២ NHS	ខៀវ	3 x	-20 អង្សាសេ
Buffer A [1]	តម្លាភាព	1 x 1.8 មីលីលីត្រ	-20 អង្សាសេ
Buffer C [2]	តម្លាភាព	3 x 1.8 មីលីលីត្រ	-20 អង្សាសេ
Buffer PE40 [3]	តម្លាភាព	3 x 1.5 មីលីលីត្រ	-20 អង្សាសេ
ddH2O	តម្លាភាព	1.5 មីលីលីត្រ	-20 អង្សាសេ
តំណភ្ជាប់ឆ្លង	ត្នោត	3 x	-20 អង្សាសេ
ជួរឈរបង្វិលការបន្សុត	ក្រហម	6 x	៦០-៧០ អង្សាសេ
បំពង់ប្រតិកម្ម 2.0 មីល្លីលីត្រ សម្រាប់ការបន្សុតជួរឈរបង្វិល		6 x	RT
ឯកតាតម្រង centrifugal (3 kDa MWCO)[4]		3 x	RT
បំពង់ប្រមូលផ្តុំ centrifugation		3 x	RT

សម្រាប់តែការស្រាវជ្រាវប៉ុណ្ណោះ។
ផលិតផលនេះមានអាយុកាលធ្នើមានកំណត់ សូមមើលកាលបរិច្ឆេទផុតកំណត់នៅលើស្លាក។

សំខាន់
ផលិតផលអាចត្រូវបានដឹកជញ្ជូននៅសីតុណ្ហភាពខុសៗគ្នា ប៉ុន្តែការផ្ទុកគួរតែប្រកាន់ខ្ជាប់នូវគោលការណ៍ណែនាំដែលមានចែងក្នុងតារាង។
កញ្ចប់មានផ្ទុកសារធាតុប្រតិកម្មគ្រប់គ្រាន់សម្រាប់ការភ្ជាប់ចំនួនប្រាំនៃប្រហែល 50-200 µg នៃជីវម៉ូលេគុលនីមួយៗ។
សារធាតុរអិលជ័រនៅក្នុងជួរឈរបង្វិលបន្សុតមាន 0.02% សូដ្យូមអាហ្សីត។

សម្ភារៈបន្ថែមដែលត្រូវការ

តារាង 2. សម្ភារៈបន្ថែម

សម្ភារៈ	មតិយោបល់
មីក្រូកណ្តាលនៅតុ	ជួរល្បឿនដែលត្រូវការពី 1,000 xg ទៅ 13,000 xg
Vortex
បំពង់ប្រតិកម្ម 1.5 មីលីលីត្រ
កាំរស្មី UV-Vis Spectrophotometer (ឧ. Nanodrop)	សម្រាប់ការប្តេជ្ញាចិត្តរបស់ ស ខ្សែលីហ្គែន ២ ការផ្តោតអារម្មណ៍របស់ conjugate

ដំណោះស្រាយ និងសតិបណ្ដោះអាសន្នទាំងអស់ត្រូវបានរួមបញ្ចូលនៅក្នុងកញ្ចប់។

កំណត់ចំណាំទូទៅសំខាន់ៗ

• ក. ខ្សែ Ligand lyophilized ប្រហែលជាមិនតែងតែត្រូវបានរកឃើញនៅផ្នែកខាងក្រោមនៃបំពង់នោះទេ។ វាអាចនៅជាប់នឹងជញ្ជាំងបំពង់ ឬនៅក្នុងគម្របបំពង់។ សូមពិនិត្យរកមើលវត្តមានរបស់ខ្សែ Ligand lyophilized ដែលកំណត់អត្តសញ្ញាណដោយរូបរាងគ្រាប់របស់វាច្បាស់លាស់ (អ្នកប្រហែលជាត្រូវដកស្លាកបំពង់ចេញដើម្បីមើលវា)។ ប្រសិនបើវាមិននៅខាងក្រោមទេ សូមដាក់កណ្តាលបំពង់ក្នុងល្បឿនលឿនពីរបីនាទីមុនពេលរំលាយ DNA នៅក្នុងទ្រនាប់។ ម៉្យាងទៀតដាក់ចុងបំពង់របស់អ្នកនៅជិតគ្រាប់ DNA ហើយបញ្ជូនសតិបណ្ដោះអាសន្នដោយផ្ទាល់ទៅលើវា; DNA នឹងរលាយយ៉ាងឆាប់រហ័ស។
• ខ. crosslinker នឹងត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងក្រុម amine បឋម (-NH2) នៃ ligand ។ អាមីនបឋមមាននៅ N-terminus នៃខ្សែសង្វាក់ polypeptide នីមួយៗ និងនៅក្នុងខ្សែសង្វាក់ចំហៀងនៃសំណល់អាស៊ីតអាមីណូ lysine ។
• គ. ជៀសវាងការប្រើ buffers ដែលមានសារធាតុ amines បឋម (ឧ. Tris, Glycine) កំឡុងពេលដំណើរការផ្សំ (សូមពិនិត្យមើលផ្នែកសន្លឹកភាពឆបគ្នា)។
• ឃ. រហូតដល់ទៅ 1 mM នៃ Dithiothreitol (DTT) អាចត្រូវបានប្រើក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការបញ្ចូលគ្នា។ ជៀសវាងការប្រើ 2-Mercaptoethanol ឬភ្នាក់ងារកាត់បន្ថយដែលមានមូលដ្ឋានលើ thiol ផ្សេងទៀតក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការផ្សំ។ ប្រសិនបើភ្នាក់ងារកាត់បន្ថយគឺចាំបាច់ TCEP ត្រូវបានណែនាំរហូតដល់ 1 mM ។
• អ៊ី ជៀសវាងការប្រើប្រូតេអ៊ីនដែលបានបន្សុតដោយផ្នែកamples ឬប្រូតេអ៊ីន samples ដែលមានក្រុមហ៊ុនដឹកជញ្ជូន (ឧទាហរណ៍ BSA) ។
• f. ដើម្បីធានាបាននូវទិន្នផលប្រតិកម្មខ្ពស់បំផុត លីហ្គែនគួរតែត្រូវបានរំលាយនៅក្នុង Buffer C. ការផ្លាស់ប្តូរសតិបណ្ដោះអាសន្នត្រូវបានណែនាំមុនពេលដំណើរការផ្សំ។
• g. មុននឹងចាប់ផ្តើម រំកិលបំពង់ទាំងអស់ដោយសង្ខេបដោយមួកពណ៌ខៀវ ពណ៌ត្នោត និងថ្លា ដើម្បីធានាថាសម្ភារៈទាំងអស់ស្ថិតនៅផ្នែកខាងក្រោមនៃបំពង់។
• h សម្រាប់ម៉ូលេគុលដែលមានទម្ងន់ម៉ូលេគុលជុំវិញ ឬទាបជាង 5 kDa ការប្រុងប្រយ័ត្នបន្ថែមគឺត្រូវបានទាមទារក្នុងអំឡុងពេលដំណើរការបន្សុត។ ម៉ូលេគុលតូចៗ និងសារធាតុ peptides មួយចំនួនអាចមិនត្រូវបានបន្សុតឱ្យបានត្រឹមត្រូវដោយប្រើជួរឈរក្រូម៉ាតដែលបានផ្តល់។ សម្រាប់ព័ត៌មានបន្ថែម សូមផ្ញើអ៊ីមែលមក support.dbs@bruker.com ។
• ខ្ញុំ ប្រសិនបើ pI នៃប្រូតេអ៊ីនគឺ < 6 នោះឧបករណ៍ pH ទាបសម្រាប់ការភ្ជាប់គ្នា (លំដាប់លេខ: HK-NHS-3) ត្រូវបានណែនាំ។ សម្រាប់ព័ត៌មានបន្ថែម សូមផ្ញើអ៊ីមែល support.dbs@bruker.com.

ការភ្ជាប់ 3 ជំហាននៃជីវម៉ូលេគុលទៅនឹងខ្សែលីហ្គែន 1

សូមអានពិធីការទាំងមូលមុនពេលចាប់ផ្តើម និងអនុវត្តគ្រប់ជំហានដោយមិនមានការរំខាន។

ជំនួយ

ពិធីការនេះអាចត្រូវបានអនុវត្តក្នុងពេលដំណាលគ្នាសម្រាប់ប្រតិកម្មភ្ជាប់ជាច្រើន។
ជៀសវាងការប្រើប្រូតេអ៊ីនដែលបានបន្សុតដោយផ្នែកamples ឬប្រូតេអ៊ីន samples ដែលមានក្រុមហ៊ុនដឹកជញ្ជូន (ឧទាហរណ៍ BSA) ។
មុនពេលចាប់ផ្តើមអនុញ្ញាតឱ្យ crosslinker ឈានដល់សីតុណ្ហភាពបន្ទប់មុនពេលប្រើ។
ចាប់ពីពេលនេះតទៅ Y-structure Ligand strand 1 NHS នឹងត្រូវបានគេហៅថា Ligand strand 1។

ការកែប្រែ Nanolever

1. Dissolve Ligand strand 1 in 40 µL Buffer A prior to use, vortex until all solids are completely dissolved and briefly spin down.
2. រំលាយ crosslinker (មួកពណ៌ត្នោត) ដោយបន្ថែម 100 µL ddH2O, vortex រហូតដល់សារធាតុរំលាយទាំងអស់ត្រូវបានរំលាយទាំងស្រុង ហើយរំកិលចុះដោយខ្លី។ សំខាន់ៈ ប្រើសមាសធាតុស្រស់ជានិច្ច។
3. Add 10 µL of the freshly prepared linker solution to one Ligand strand 1 aliquot. Discard the remaining linker solution from step 2.
4. Vortex បញ្ចេញប្រតិកម្មរយៈពេល 10 វិនាទី បង្វិលចុះក្រោម និង incubate រយៈពេល 20 នាទីនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់។
   សំខាន់ កុំលើសពីពេលវេលាភ្ញាស់ ឬទិន្នផលប្រតិកម្មនឹងថយចុះ។
5. ក្នុងពេលនេះ ធ្វើឱ្យស្មើគ្នានូវជួរឈរបង្វិលបន្សុតចំនួនពីរ (មួកក្រហម) សម្រាប់ប្រតិកម្មភ្ជាប់មួយ៖
   • ក. ដោះគម្របបាតរបស់ជួរឈរ ហើយបន្ធូរមួក (កុំដកមួក)។
   • ខ. ដាក់ជួរឈរក្នុងបំពង់ប្រតិកម្ម 2.0 មីលីលីត្រ។
   • c. Centrifuge at 1,500 x g for 1 minute to remove the storage solution.
   • d. Add 400 µL of Buffer C to the column’s resin bed. Centrifuge at 1,500 x g for 1 minute to remove buffer.
   • អ៊ី ធ្វើជំហាន d ម្តងទៀត ហើយបោះចោលសតិបណ្ដោះអាសន្នលទ្ធផលចេញពីបំពង់ប្រតិកម្ម។ ជួរឈរបង្វិលការបន្សុតនៅពេលនេះគួរតែស្ថិតក្នុងសភាពស្ងួត។
6. Sampការផ្ទុក
   • ក. ដាក់ជួរឈរពីជំហានទី 5 នៅក្នុងបំពង់ប្រតិកម្ម 1.5 មីលីលីត្រថ្មី។
   • ខ. ដោះមួកនៃជួរឈរបង្វិលលេខ 1 ហើយអនុវត្ត sample ពីជំហានទី 4 ទៅកំពូលនៃគ្រែជ័រ។
   • c. Centrifuge at 1,500 x g for 2 minutes to collect the sampឡេ (លំហូរឆ្លងកាត់) ។ បោះបង់ជួរឈរបង្វិលការបន្សុតបន្ទាប់ពីប្រើ។
   • ឃ. ដោះមួកនៃជួរឈរបង្វិលលេខ 2 ហើយអនុវត្ត sample ពីជំហាន c ទៅគ្រែជ័រ។
   • e. Centrifuge at 1,500 x g for 2 minutes to collect the sampឡេ (លំហូរឆ្លងកាត់) ។ បោះបង់ជួរឈរបង្វិលការបន្សុតបន្ទាប់ពីប្រើ។

ការផ្សំ Ligand

1. បន្ថែមប្រហែល។ 100 µg (អតិបរមា 200 µg) នៃ ligand (កំហាប់ប្រហែល 0.5 – 50 mg/mL) ដល់ sample ពីជំហានទី 6. សម្រាប់លក្ខខណ្ឌល្អប្រសើរបំផុត ប្រើបរិមាណប្រហាក់ប្រហែល។ 50 μL
   EXAMPLE: លៃតម្រូវកំហាប់ប្រូតេអ៊ីនដល់ 2 mg/mL ហើយប្រើ 50 µL សម្រាប់ការផ្សំ។
   សំខាន់ ត្រូវប្រាកដថាសតិបណ្ដោះអាសន្នផ្ទុកនៃ ligand មិនមានសារធាតុ amines បឋមណាមួយឡើយ ឧ. Tris buffers, glycine (សូមពិនិត្យមើលចំណាំសំខាន់ៗ)។
2. លាយ​ប្រតិកម្ម​ដោយ​ដាក់​បំពង់​ឡើងលើ​ចុះក្រោម ហើយ​ទុក​ឱ្យ​វា​មាន​ប្រតិកម្ម​នៅ​សីតុណ្ហភាព​បន្ទប់​យ៉ាងហោចណាស់ 1 ម៉ោង។
   សំខាន់ មិនត្រូវខ្យល់។ បើចាំបាច់ ប្រតិកម្មអាចត្រូវបានអនុវត្តនៅសីតុណ្ហភាព 4°C ជាមួយនឹងពេលវេលាប្រតិកម្មយូរជាងនេះ (ឧទាហរណ៍ ពេញមួយយប់)។

proFIRE® ការបន្សុត

1. អនុវត្តការបន្សុតដោយប្រើដំណើរការការងារproFIRE®ដែលសមស្រប (សូមមើលសៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់proFIRE®)។ សូមប្រាកដថា សampបរិមាណគឺ 160 μL។
   1. ក. ប្រសិនបើបរិមាណតិចជាង 160 µL សូមបំពេញបរិមាណដែលបាត់ដោយ Buffer A ។
      ខ. ប្រសិនបើបរិមាណលើសពី 160 µL សូមអនុវត្តបន្ថែម 160 µL ដំណើរការរហូតដល់ sampឡេត្រូវបានប្រើប្រាស់។
   2. ប្រើទិន្នន័យ Viewកម្មវិធី er របស់proFIRE® ដើម្បីកំណត់ថាប្រភាគណាមួយមាន conjugate សុទ្ធ។
      អតីតមួយample chromatogram ត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងផ្នែកពត៌មានបន្ថែម៖ ការបន្សុតproFIRE® នៃ Ligand strand 1 conjugate ។
   3. យកប្រភាគដែលបានណែនាំចេញពីអ្នកប្រមូលប្រភាគ។

ជំនួយ

កុំរក្សាទុក Ligand strand 1 conjugate សម្រាប់រយៈពេលយូរនៅក្នុងសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលកំពុងដំណើរការproFIRE®។ បន្តភ្លាមៗជាមួយនឹងការផ្លាស់ប្តូរសតិបណ្ដោះអាសន្ន។

Buffer Exchange

1. Add 500 µL of the first proFIRE® fraction containing the Ligand strand 1 conjugate to the centrifugal filter unit. Centrifuge at 13,000 x g (up to 14,000 x g) for 10 minutes and discard the flow-through.
2. បន្ថែមប្រភាគដែលនៅសល់ទៅឯកតាតម្រងដូចគ្នា ហើយធ្វើជំហាន centrifugation ម្តងទៀត ដើម្បីប្រមូល s ទាំងអស់amples ក្នុងបំពង់មួយ។ (សូមពិនិត្យមើលព័ត៌មានបន្ថែម៖ ការផ្លាស់ប្តូរសតិបណ្ដោះអាសន្ន និងការប្រមូលផ្តុំជាមួយនឹងឯកតាតម្រង centrifugal)។
3. បន្ថែម 350 µL នៃ PE40 (ឬ TE40, HE40) buffer និង centrifuge នៅ 13,000 xg រយៈពេល 10 នាទី។ បោះបង់ចោលលំហូរឆ្លងកាត់។
   សំខាន់ ប្រសិនបើប្រូតេអ៊ីនមិនមានស្ថេរភាពនៅក្នុង PE40 (ឬ TE40, HE40) សូមពិនិត្យមើលភាពឆបគ្នានៃទ្រនាប់ជាមួយនឹងសន្លឹកភាពឆបគ្នារបស់ switchSENSE®។
4. បន្ថែម 350 µL នៃ PE40 (ឬ TE40, HE40) buffer និង centrifuge នៅ 13,000 xg រយៈពេល 15 នាទី។ បោះបង់ចោលលំហូរឆ្លងកាត់។
5. To recover the Ligand strand 1 conjugate, place the centrifugal filter unit upside down in a new centrifugal collection tube (provided in the kit).
   បង្វិលនៅ 1,000 xg សម្រាប់ 2 នាទីដើម្បីផ្ទេរ sampទៅបំពង់។

Aliquots និងការផ្ទុក

1. Measure the absorbance of the Ligand strand 1 conjugate at 260 nm នៅលើឧបករណ៍វាស់កាំរស្មី UV-Vis Spectrophotometer (ឧទាហរណ៍ Nanodrop) ។
2. Determine the concentration of the Ligand strand 1 conjugate (c1) by inserting into the following equation:where d is the path length (usually equal to 1 cm; however, please check the UV-Vis Spectrophotometer user manual) and  is the extinction coefficient of the DNA at 260 nm, equal to 272,000.
3. សម្រាប់ដំណោះស្រាយដែលត្រៀមរួចជាស្រេចក្នុងការប្រើប្រាស់សម្រាប់មុខងារ biochip សូមកែតម្រូវកំហាប់ដល់ 500 nM (ឬរហូតដល់ 1 µM) ជាមួយនឹង PE40 (ឬ TE40, HE40) buffer (រួមទាំងរហូតដល់ 10% glycerol បើចាំបាច់) ហើយរៀបចំ 20 µL aliquots .
4. ទុកចន្លោះពី -86°C ដល់ 8°C តាមចិត្តចង់។
   ស្ថេរភាពនៃដំណោះស្រាយគឺទាក់ទងទៅនឹងស្ថេរភាពនៃម៉ូលេគុល ligand ។
   សំខាន់ មុនពេលការវាស់វែងអន្តរកម្ម SwitchSENSE® សូមបន្ថែមខ្សែអាដាប់ទ័រដែលសមស្របទៅនឹងដំណោះស្រាយរួម។

ព័ត៌មានបន្ថែម

ការបន្សុត proFIRE® នៃ Ligand strand 1 conjugate

1. ដើម្បីធានាបាននូវលទ្ធផលល្អបំផុតពីការវាស់វែង គ្មាន Ligand strand 1 ឥតគិតថ្លៃគួរមានវត្តមាននៅលើបន្ទះឈីបនោះទេ។ ដូច្នេះ សារធាតុផ្សំរបស់ Ligand strand 1 ត្រូវតែត្រូវបានបន្សុតដោយការផ្លាស់ប្តូរ ion chromatography មុនពេលធ្វើការវាស់វែង។ ជំហានត្រួតពិនិត្យគុណភាពនេះផ្តល់ឱ្យអ្នកនូវព័ត៌មានមានប្រយោជន៍បន្ថែមអំពី s របស់អ្នក។ampភាពបរិសុទ្ធ។
2. យើងសូមណែនាំឱ្យប្រើប្រព័ន្ធproFIRE® ដែលបំពាក់ដោយជួរឈរផ្លាស់ប្តូរអ៊ីយ៉ុង Buffer A [1] និង Buffer B [5] ដែលមានសមាសភាពដូចគ្នា ប៉ុន្តែកំហាប់អំបិលខុសគ្នា ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានការបំបែកកំពូល។
   សំខាន់ សម្រាប់ Y-structure Ligand strand 1 – NHS kit សូមបញ្ចូល 24 ជាប្រវែង DNA (ប្រភេទទី 1) នៅពេលចាប់ផ្តើមកម្មវិធីបន្សុត។
   In Figure 1 a typical proFIRE® chromatogram of a Ligand strand 1 conjugate purification is depicted, where the peak of the protein-DNA conjugate is separated from the free protein (left) and the free DNA (right).
   សំខាន់: The proFIRE® system owns a tailored software for automatic recognition and quantitation of DNA conjugates.
3. បន្ទាប់ពីការបន្សុត ប្រមូលប្រភាគ Ligand strand 1 conjugate ប្រភាគ (រូបភាពទី 1: ប្រភាគ 8-10) ប្រមូលផ្តុំ conjugate ហើយផ្លាស់ប្តូរសតិបណ្ដោះអាសន្នជាមួយនឹងជម្រើសរបស់អ្នកដោយប្រើ centrifugal filter unit ដូចដែលបានពិពណ៌នានៅក្នុងផ្នែក II។Figure 1. proFIRE® chromatogram of a ligand strand conjugate purification. Used buffers: Buffer A [1]; Buffer B [5].
   Column: proFIRE® column. Flow: 1 mL/min. Used program: DNA length 24, Type 1.

Buffer Exchange and Concentration with Centrifugal Filter Units

1. Take one centrifugal filter unit, add the appropriate volume (500 µL) of buffer in the filter device, and cap it.
2. ដាក់ឧបករណ៍តម្រងដែលបិទភ្ជាប់ទៅក្នុង rotor centrifuge ដោយតម្រឹមខ្សែមួកឆ្ពោះទៅកណ្តាលនៃ rotor; តុល្យភាពជាមួយឧបករណ៍ស្រដៀងគ្នា។
3. បង្វិលឧបករណ៍នៅ 13,000 xg (ឬ 14,000 xg) សម្រាប់ពេលវេលាដែលបានផ្តល់ឱ្យ។
4. Remove the flow through and repeat steps 1-3 with 350 µL volume.
5. ដោះឧបករណ៍ដែលបានផ្គុំចេញពី centrifuge ហើយបំបែកឧបករណ៍ចម្រោះចេញពីបំពង់ microcentrifuge ។
6. ដើម្បីយកឧបករណ៍ចម្រោះមកវិញ សូមដាក់ឧបករណ៍ចម្រោះដាក់បញ្ច្រាសនៅក្នុងបំពង់ centrifugal ស្អាត តម្រឹមមួកចំហរឆ្ពោះទៅកណ្តាលនៃ rotor ។ តុល្យភាពជាមួយឧបករណ៍ស្រដៀងគ្នា។ បង្វិលរយៈពេល 2 នាទីនៅ 1,000 xg ដើម្បីផ្ទេរ sample ពីឧបករណ៍ទៅបំពង់។

សន្លឹកភាពឆបគ្នា។

សារធាតុបន្ថែមសតិបណ្ដោះអាសន្ន
ការភ្ជាប់នៃ ligands ជាមួយនឹងឧបករណ៍ភ្ជាប់ដែលមានទាំងអស់អាចត្រូវបានអនុវត្តជាមួយនឹងសារធាតុបន្ថែមផ្សេងៗគ្នាជាច្រើន។ បញ្ជីខាងក្រោមបង្ហាញការសាកល្បងទាំងអស់ ប៉ុន្តែសូមចំណាំថាអ្នកផ្សេងទៀតដែលមិនបានរាយបញ្ជីនៅទីនេះក៏អាចត្រូវបានប្រើដោយជោគជ័យផងដែរ។

* ភ្នាក់ងារកាត់បន្ថយដែលមានមូលដ្ឋានលើ thiol
** មានសារធាតុអាមីនបឋម
*** ប្រយ័ត្នអាចប៉ះពាល់ដល់សរសៃចង

pH/pI

តម្លៃ pH សម្រាប់សតិបណ្ដោះអាសន្នផ្សំអាចមានចាប់ពី pH 5.0 ដល់ pH 8.0 អាស្រ័យលើលក្ខណៈរបស់ ligand ។ នៅពេលអនុវត្តការរួមផ្សំនៃប្រូតេអ៊ីនដែលមាន pI នៃ < 6 សូមចំណាំថាការប្រើសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលមាន pH ទាបអាចនាំឱ្យទិន្នផលនៃ conjugate ប្រសើរជាងមុន។

សតិបណ្ដោះអាសន្ន	pH	លំដាប់លេខ	សមាសភាព
ផូស្វ័រ-ស៊ីតត្រាត សតិបណ្ដោះអាសន្ន	pH 5	–	អំបិលសតិបណ្ដោះអាសន្ន 50 mM, 150 mM NaCl
Buffer M	pH 6.5	BU-M-150-1	50 mM MES, 150 mM NaCl
Buffer A	pH 7.2	BU-P-150-10	50 mM Na2HPO4/ NaH2PO4, 150 mM NaCl
Buffer C	pH 8.0	BU-C-150-1	50 mM Na2HPO4/ NaH2PO4, 150 mM NaCl

កំហាប់អំបិល
សម្រាប់ការភ្ជាប់ស្តង់ដារ អំបិលសតិបណ្ដោះអាសន្ន 50 mM និង 150 mM NaCl (អំបិល monovalent) ត្រូវបានប្រើ។
នៅពេលអនុវត្តការភ្ជាប់នៃលីហ្គែនដែលមានបន្ទុកខ្លាំង ត្រូវប្រាកដថាកំហាប់នៃ NaCl មានកម្រិតខ្ពស់គ្រប់គ្រាន់ (រហូតដល់ 400 mM NaCl ត្រូវបានណែនាំ)។ បើមិនដូច្នោះទេ ទឹកភ្លៀងនៃ DNA អាចកើតឡើង។
The shielding effect of monovalent sodium cations leads to DNA stabilisation through neutralisation of the negative charge on the sugar phosphate backbone.

លេខលំដាប់ដែលមានប្រយោជន៍

តារាង 3. លេខលំដាប់

ឈ្មោះផលិតផល	ចំនួនទឹកប្រាក់	លំដាប់លេខ
ឧបករណ៍ភ្ជាប់អាមីនរចនាសម្ព័ន្ធ Y 2 - ពណ៌បៃតង	3 បន្សំ	HK-NYS-NHS-2
ឯកតាតម្រង centrifugal (10 kDa MWCO)	5 កុំព្យូទ័រ។	CF-010-5
10x Buffer A [1]	50 មីលីលីត្រ (ទិន្នផល 500 មីលីលីត្រ)	BU-P-150-10
5x Buffer B [5]	50 មីលីលីត្រ (ទិន្នផល 250 មីលីលីត្រ)	BU-P-1000-5
1x Buffer C [2]	12 មីលីលីត្រ	BU-C-150-1

ទំនាក់ទំនង

ថាមវន្ត Biosensors GmbH
Perchtinger Str. 8/10 81379 ទីក្រុង Munich ប្រទេសអាល្លឺម៉ង់

Bruker Scientific LLC
40 Manning Road, Manning Park Billerica, MA 01821 USA

ព័ត៌មានបញ្ជាទិញ order.biosensors@bruker.com
ជំនួយបច្ចេកទេស support.dbs@bruker.com

www.dynamic-biosensors.com
Instruments and chips are engineered and manufactured in Germany. ©2025 Dynamic Biosensors GmbH
សម្រាប់ការប្រើប្រាស់ស្រាវជ្រាវតែប៉ុណ្ណោះ។ មិនមែនសម្រាប់ប្រើក្នុងនីតិវិធីវិនិច្ឆ័យរោគទេ។

1. Buffer A: 50 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 150 mM NaCl, pH 7.2
2. Buffer C: 50 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 150 mM NaCl, pH 8.0
3. Buffer PE40: 10 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 40 mM NaCl, pH 7.4, 0.05% Tween, 50 µM EDTA, 50 µM EGTA
4. សម្រាប់ការភ្ជាប់ប្រូតេអ៊ីនដែលមានទម្ងន់ម៉ូលេគុលលើសពី 20 kDa៖ ឯកតាតម្រង centrifugal ជាមួយ MWCO នៃ 10 kDa អាចត្រូវបានបញ្ជាសម្រាប់ដំណើរការប្រមូលផ្តុំលឿនជាងមុន (លំដាប់លេខ: CF-010-5) ។
5. Buffer B: 50 mM Na2HPO4/NaH2PO4, 1 M NaCl, pH 7.2

www.dynamic-biosensors.com

ឯកសារ/ធនធាន

ថាមវន្ត BIOSENSORS Y-Structure Amine Coupling Kit 1 [pdf] សៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់ HK-NYS-NHS-1, Y-Structure Amine Coupling Kit 1, Amine Coupling Kit 1, Coupling Kit 1, Kit 1

ឯកសារយោង

• សៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់