ថាមវន្ត-BIOSENSORS-LOGO

ថាមវន្ត BIOSENSORS heliX cyto ប្រព័ន្ធវិភាគមន្ទីរពិសោធន៍ស្វ័យប្រវត្តិពេញលេញ

dynamic-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-PRODUCT

លក្ខណៈបច្ចេកទេស

  • ឈ្មោះផលិតផល៖ heliX cyto
  • ក្រុមហ៊ុនផលិត៖ ថាមវន្ត Biosensors GmbH
  • កំណែ៖ 1.0

ព័ត៌មានអំពីផលិតផល

  • ប្រព័ន្ធ heliX cyto ត្រូវបានរចនាឡើងសម្រាប់ single-cell Interaction Cytometry (scIC) ដើម្បីវាស់ kinetics ចងនៃម៉ូលេគុលដែលមានស្លាក fluorescently ទៅគោលដៅលើផ្ទៃក្រឡាក្នុងលក្ខណៈដែលបានដោះស្រាយពេលវេលា។

ការណែនាំអំពីការប្រើប្រាស់ផលិតផល

ការប្រើប្រាស់បន្ទះឈីប heliXcyto

  • បន្ទះឈីប heliXcyto មានឆានែល microfluidic តែមួយដែលមានចំណុចអេឡិចត្រូតសម្រាប់ការចាប់យក និងវាស់កោសិកា។ ធានានូវការដាក់បន្ទះឈីបឱ្យបានត្រឹមត្រូវ និងធ្វើតាមការណែនាំសម្រាប់ដាក់ក្រឡា។

បន្ទះឈីបថែទាំ

  • ប្រើ Maintenance Chip សម្រាប់ការសម្អាត ការធ្វើតេស្ត និងប្រតិបត្តិការថែទាំតែប៉ុណ្ណោះ។ ជៀសវាងការប្រើវាសម្រាប់ការពិសោធន៍ដើម្បីការពារការចម្លងរោគ។

កំពុងដំណើរការ Buffer

  • ប្រើការរត់ Buffer 1 (RB 1) កំឡុងពេលវាស់។ សូមមើលសន្លឹកភាពឆបគ្នា scIC នៅក្នុងការណែនាំចម្បងសម្រាប់ព័ត៌មានលម្អិត។

ការវិភាគឧបករណ៍ចាប់សញ្ញា

  • ត្រួតពិនិត្យ sensorgram ក្នុងពេលវេលាជាក់ស្តែងនៅក្នុងកម្មវិធី heliOS កំឡុងពេលវាស់។ វិភាគការឆ្លើយតប fluorescent តាមពេលវេលាដើម្បីទាញយកអត្រា kinetic ។

អកម្ម

  • ពិចារណាលើការប្រើប្រាស់ passivation ជាជំហានស្រេចចិត្តដើម្បីការពារការស្រូបយកសារធាតុវិភាគដោយ incubating a passivation reagent នៅលើបន្ទះឈីប។

ការធ្វើឱ្យមានលក្ខណៈធម្មតា។

  • Normalization គឺជាដំណើរការមួយដើម្បីធ្វើស្តង់ដារទិន្នន័យសម្រាប់ការប្រៀបធៀប និងការវិភាគ។ អនុវត្តតាមនីតិវិធីធ្វើឱ្យមានលក្ខណៈធម្មតាដូចក្នុងសៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់។

ការណែនាំ

  • ការណែនាំនេះមានន័យខ្លីៗview នៃប្រព័ន្ធ heliXcyto និងសមត្ថភាពរបស់វា។ ជំពូកទាំងអស់ត្រូវបានពង្រីកនៅក្នុងមគ្គុទ្ទេសក៍ heliXcyto ចម្បងដែលរកឃើញនៅ https://www.dynamic-biosensors.com/helios-download-latest/

heliXcyto វាក្យសព្ទ ស៊ីតូមេទ្រីអន្តរកម្មកោសិកាតែមួយ

  • single-cell Interaction Cytometry (scIC) គឺជាបច្ចេកវិទ្យាមួយដែលវាស់ស្ទង់ការចងនៃ kinetics នៃម៉ូលេគុលដែលមានស្លាក fluorescent (វិភាគ) ទៅនឹងគោលដៅមួយ (ligand) នៅលើផ្ទៃក្រឡាដោយការកត់ត្រាសញ្ញា fluorescent ក្នុងលក្ខណៈដែលបានដោះស្រាយ។

វិភាគ

  • Analyte គឺជាម៉ូលេគុលដែលមានស្លាក fluorescent ក្នុងដំណាក់កាលចល័ត ដែលអាចភ្ជាប់ទៅនឹងគោលដៅនៅលើផ្ទៃក្រឡា។

លីហ្គែន

  • Ligand” គឺជាឈ្មោះដែលប្រើក្នុងកម្មវិធី heliOS ដើម្បីពណ៌នាអំពីគោលដៅនៅលើផ្ទៃក្រឡាដែលឧបករណ៍វិភាគអាចចងបាន។ វាអាចជាម៉ូលេគុលទទួល ជាតិខ្លាញ់ ស្ករ ឬម៉ូលេគុលផ្ទៃក្រឡាផ្សេងទៀត។

អន្ទាក់ក្រឡា

  • អន្ទាក់កោសិកាគឺជាទ្រុងវត្ថុធាតុ polymer ដែលអាចជ្រាបចូលបាន និងអាចជ្រាបចូលបានដោយជីវគីមីនៅលើបន្ទះឈីប heliXcyto ។ ពួកវាត្រូវបានរចនាឡើងដើម្បីចាប់យក និង immobilize កោសិកាដែលមានទំហំខុសគ្នាពីប្រហែល 6 ទៅ 25 µm នៅក្នុងបណ្តាញលំហូរ។ អន្ទាក់កោសិកាមានបីទំហំខុសៗគ្នា៖ តូច មធ្យម និងធំ។

បន្ទះឈីប heliXcyto

  • បន្ទះសៀគ្វី heliXcyto មានឆានែល microfluidic តែមួយជាមួយនឹងការបើកនៅសងខាង។ ចំណុចអេឡិចត្រូតមាសពីរស្ថិតនៅចំកណ្តាលឆានែល។
  • កន្លែងមួយបម្រើជាកន្លែងយោង ហើយកន្លែងទីពីរមានទ្រុងវត្ថុធាតុ polymer 3D ដែលត្រូវគ្នាសម្រាប់ការចាប់យកកោសិកា និងបម្រើជាកន្លែងវាស់ស្ទង់។ កន្លែងវាស់អាចមាន 1 ឬ 5 អន្ទាក់នៃប្រភេទដូចគ្នា។
  • កន្លែងយោងអនុញ្ញាតឱ្យមានការយោងតាមពេលវេលាជាក់ស្តែងនៃសញ្ញា fluorescent ដែលប្រមូលបាន។ បន្ទះឈីប heliXcyto គឺអាចប្រើឡើងវិញបាន និងអាចចោលបាន។ថាមវន្ត-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-FIG-1 ថាមវន្ត-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-FIG-2

បន្ទះឈីបថែទាំ

  • Maintenance Chip គឺជាបន្ទះឈីប microfluidic ឆានែលតែមួយ ដែលប្រើសម្រាប់ប្រតិបត្តិការសម្អាត ការធ្វើតេស្ត និងការថែទាំទាំងអស់។
  • ប្រតិបត្តិការទាំងនេះរួមមាន ទម្លាប់សម្អាត និងគេង ភ្ញាក់ឡើង និងទម្លាប់សំខាន់ ការលាងសម្អាតប្រព័ន្ធ និងការធ្វើតេស្ត Fluidics ។ បន្ទះឈីបនេះមិនគួរត្រូវបានប្រើប្រាស់សម្រាប់ការពិសោធន៍ជាក់ស្តែងជាមួយនឹងដំណោះស្រាយកោសិកា/ប្រូតេអ៊ីន ដើម្បីការពារការចម្លងមេរោគបន្ថែមទៀតនៃបន្ទះឈីបនោះទេ។

កំពុងដំណើរការ Buffer

  • សតិបណ្ដោះអាសន្នដែលកំពុងដំណើរការគឺជាសតិបណ្ដោះអាសន្នដែលប្រើក្នុង heliXcyto កំឡុងពេលវាស់។ ការប្រើប្រាស់ Running Buffer 1 (RB 1) ជាទូទៅត្រូវបានណែនាំ។
  • សូមយោងទៅលើសន្លឹកភាពឆបគ្នារបស់ scIC ដែលមាននៅក្នុងការណែនាំចម្បងសម្រាប់ព័ត៌មានបន្ថែម។

ឧបករណ៍ចាប់សញ្ញា

  • scIC sensorgram គឺជាគ្រោងនៃការឆ្លើយតប fluorescence ក្នុងមួយវិនាទី (cps) តាមពេលវេលា ដែលបង្ហាញពីការវិវត្តនៃអន្តរកម្មនៅលើ ឬនៅក្នុងកោសិកា។ ខ្សែកោងនេះអាចជា viewed នៅក្នុងពេលវេលាពិតនៅក្នុង heliOS កំឡុងពេលវាស់។
  • នៅពេលវិភាគឧបករណ៍ចាប់សញ្ញា និទស្សន្តដែលសមល្អបំផុតទៅនឹងដាន fluorescent ដែលបានសង្កេតត្រូវបានកំណត់ ហើយអត្រា kinetic (kon, koff) ត្រូវបានស្រង់ចេញ។ថាមវន្ត-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-FIG-3

អកម្ម

  • Passivation គឺជាជំហានស្រេចចិត្តក្នុងការរត់ ដែលសារធាតុ passivation reagent ត្រូវបានចាក់ទៅលើបន្ទះឈីប និង incubated ដើម្បីទប់ស្កាត់ផ្ទៃ។ នេះអាចជួយការពារការស្រូបយកធាតុវិភាគទៅសម្ភារៈបន្ទះឈីប។

ការធ្វើឱ្យមានលក្ខណៈធម្មតា។

  • ជំហាននៃការធ្វើឱ្យមានលក្ខណៈធម្មតាត្រូវបានប្រើប្រាស់ក្នុងគណនីសម្រាប់ភាពខុសគ្នាបន្តិចបន្តួចនៃសញ្ញាដោយសារតែការប្រមូលសញ្ញាពីកន្លែងវាស់នីមួយៗដោយឧបករណ៍រាវរកដាច់ដោយឡែក។ ថ្នាំជ្រលក់ fluorescent នៃកំហាប់ដែលបានកំណត់ (ផ្អែកលើកំហាប់ការវិភាគខ្ពស់បំផុត និងកម្រិតនៃការដាក់ស្លាកវិភាគ) ត្រូវបានចាក់នៅពេលចាប់ផ្តើមនៃការវិភាគ។ ជំហាននៃការធ្វើឱ្យធម្មតានេះត្រូវបានរួមបញ្ចូលដោយស្វ័យប្រវត្តិនៅក្នុងវិធីសាស្រ្តវាស់វែង ហើយកម្រិតនៃការធ្វើឱ្យធម្មតាដែលបានវាស់វែងត្រូវបានប្រើដើម្បីកែតម្រូវដោយស្វ័យប្រវត្តិចំពោះភាពខុសគ្នារវាងឧបករណ៍រាវរកក្នុងអំឡុងពេលការវិភាគទិន្នន័យ មុនពេលការយោងតាមពេលវេលាជាក់ស្តែង។

គោលការណ៍វាស់វែង scIC

កម្មវិធី scIC

  • single-cell Interaction Cytometry (scIC) វាស់អត្រា kinetic និងភាពជាប់ទាក់ទងនៃការវិភាគដែលមានស្លាក fluorescently ភ្ជាប់ទៅនឹង និង unbinding ពីគោលដៅរបស់វាដោយផ្ទាល់នៅលើកោសិការស់នៅ។
  • ការរកឃើញនៃការវិភាគនៅក្នុង scIC គឺមានទំហំឯករាជ្យ ហើយដូច្នេះវាពាក់ព័ន្ធទៅនឹងម៉ូលេគុលណាមួយពី sub-nm ទៅ> 100 nm និងពាក់ព័ន្ធទៅនឹងថ្នាក់ម៉ូលេគុលទាំងអស់ចាប់ពីម៉ូលេគុលតូច peptides aptamers nanobodies affibodies អង្គបដិបក្ខ ទម្រង់អង្គបដិប្រាណ bispecific antibody ស្មុគស្មាញ ប្រូតេអ៊ីត lipes (ប្រូតេអ៊ីនមួយចំនួន) ភាគល្អិតណាណូ និងមេរោគ។

បច្ចេកវិទ្យា scIC អាចដោះស្រាយផ្នែកកម្មវិធីខាងក្រោម៖

  • ការវាស់វែងនៃសញ្ញា amplitudes នៅក្នុងអេក្រង់ចង
  • ការវិភាគ kinetic នៃអត្រា kon និង koff
  • ការវាយតម្លៃភាពស្និទ្ធស្នាល និងភាពរីករាយ តាមរយៈគំរូសមភាគី កូហ្វ និងប៊ីហ្វាស៊ីក
  • ការធ្វើតេស្តភាពជាក់លាក់
  • បរិមាណដែលទាក់ទងនៃប្រូតេអ៊ីនភ្នាសនៅលើផ្ទៃកោសិកា
  • epitope binning និងការសិក្សាការប្រកួតប្រជែង
  • ការធ្វើតេស្តរារាំង
  • ការវាយតម្លៃផ្ទៃក្នុងនៃប្រូតេអ៊ីនគោលដៅ

heliXcyto សមត្ថភាពផ្នែករឹង

ប្រព័ន្ធរាវ

  • ប្រព័ន្ធរាវនៃ heliXcyto ត្រូវបានចុកដោយដបសតិបណ្ដោះអាសន្នរហូតដល់ 3 ផ្សេងគ្នា ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានការប្រែប្រួលក្នុងការដំណើរការ និងសតិបណ្ដោះអាសន្នថែទាំ។ ស្នប់នៅក្នុង heliXcyto អាចត្រូវបានកំណត់ទៅជាអត្រាលំហូររវាង 20 និង 500 μL / នាទី, ការផ្តល់អាហារដល់ផ្សេងគ្នា sample និង​តម្រូវការ​នៃ​ការ​វិភាគ។ ឆានែលលំហូរនៃបន្ទះឈីបភ្ជាប់ទៅនឹងប្រព័ន្ធរាវតាមរយៈការបើកពីរ។ ការបើកផ្នែកខាងឆ្វេងត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹង sample, buffer, and wash line, ខណៈពេលដែលការបើកផ្នែកខាងស្តាំត្រូវបានភ្ជាប់ទៅនឹងបន្ទាត់បង្កើតឡើងវិញ។
  • ប្រព័ន្ធលំហូរពីរផ្លូវនេះអនុញ្ញាតឱ្យចាប់យកកោសិកាដែលមានស្ថេរភាព ខណៈពេលដែលដំណើរការជំហានផ្សេងគ្នានៃការវាស់វែង ហើយទីបំផុតការបង្កើតឡើងវិញនូវបន្ទះឈីបសម្រាប់ការប្រើប្រាស់ឡើងវិញនូវបន្ទះឈីបនៅក្នុងការវិភាគ។ថាមវន្ត-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-FIG-4
  • រូបភាពទី 1 ។ ការរួមបញ្ចូលបន្ទះឈីបនៅក្នុងប្រព័ន្ធ Fluidic

ប្រព័ន្ធអុបទិក

  • សញ្ញា fluorescence ត្រូវបានរំភើបដោយ diodes បញ្ចេញពន្លឺក្រហម និងបៃតង (LEDs) និងបានរកឃើញដោយបញ្ជរតែមួយ-photon ចំនួនបួន ដែលប្រមូលសញ្ញាពណ៌ក្រហម និងបៃតងពីកន្លែងនីមួយៗនៅទូទាំងជម្រៅពេញនៃឆានែល។
  • សញ្ញាឯករាជ្យពីរអាចត្រូវបានត្រួតពិនិត្យក្នុងពេលដំណាលគ្នានៅលើកន្លែងវាស់ដូចគ្នា ដែលអនុញ្ញាតឱ្យអន្តរកម្មពីរត្រូវបានវាស់នៅពេលតែមួយនៅក្នុងការដំឡើងការវាយតម្លៃពីរពណ៌។ថាមវន្ត-BIOSENSORS-heliX-cyto-Fully-Automated-Laboratory-Analysis-System-FIG-5
  • រូបភាពទី 2 ។ ការដំឡើងអុបទិក
  • ការប្រមូលសញ្ញាពីកន្លែងវាស់វែងនីមួយៗត្រូវបានគ្រប់គ្រងដោយឧបករណ៍ចាប់សញ្ញាដាច់ដោយឡែក ដែលអាចបណ្តាលឱ្យមានភាពខុសគ្នាបន្តិចបន្តួចនៅក្នុងចំនួនឆៅ។ ដើម្បី​គិត​ដល់​ចំណុច​នេះ ជំហាន​ធម្មតា​ត្រូវ​បាន​រួម​បញ្ចូល​ដោយ​ស្វ័យ​ប្រវត្តិ​ក្នុង​ការ​វិភាគ​បង្កើត​ទិន្នន័យ។
  • បន្ថែមពីលើបញ្ជររូបថតតែមួយ ឧបករណ៍នេះត្រូវបានបំពាក់ដោយកាមេរ៉ា CCD និងមីក្រូទស្សន៍ពន្លឺឆ្លុះបញ្ចាំង។ ឧបករណ៍ទាំងនេះអនុញ្ញាតឱ្យមានរូបភាពកោសិកាក្នុងពេលវេលាជាក់ស្តែង ដែលអនុញ្ញាតឱ្យមានការវាយតម្លៃអំពីភាពត្រឹមត្រូវនៃកោសិកា និងគុណភាពវិភាគទូទាំងការវាស់វែង។
  • ការរៀបចំរួមបញ្ចូលគ្នានេះធានាទាំងអន្តរកម្ម និងលក្ខខណ្ឌជីវសាស្រ្តត្រូវបានតាមដាន ដោយផ្តល់នូវការវាយតម្លៃដ៏ទូលំទូលាយនៃការពិសោធន៍។

លំហូរការងារ scIC

ដំណើរការវាស់វែង scIC អាចត្រូវបានបែងចែកជា 3 ជំហានសំខាន់ៗ

  1. ការរចនាពិសោធន៍នៅក្នុង heliOS៖ ការវាស់វែងនីមួយៗចាប់ផ្តើមដោយការរចនាការពិសោធន៍នៅក្នុងកម្មវិធី heliOS ។ លំហូរការងារនៃការវិភាគត្រូវបានបង្កើតឡើងដោយជ្រើសរើសវិធីសាស្ត្រដែលបានកំណត់ជាមុន និងការកែតម្រូវប៉ារ៉ាម៉ែត្រពិសោធន៍ ដូចជាបន្ទាត់ក្រឡាដែលបានប្រើ ការប្រមូលផ្តុំការវិភាគ និងលក្ខខណ្ឌបណ្តោះអាសន្ន។ heliOS គណនាដោយស្វ័យប្រវត្តិនូវបរិមាណជាក់លាក់នៃកោសិកា ការវិភាគ សតិបណ្ដោះអាសន្ន និងដំណោះស្រាយផ្សេងទៀតដែលចាំបាច់សម្រាប់ការវាស់វែង សម្រួលដំណើរការរៀបចំ។
  2. ការរៀបចំសតិបណ្ដោះអាសន្ន ការវិភាគ និងកោសិកា៖ បន្ទាប់ពីការរចនាពិសោធន៍ត្រូវបានបញ្ចប់ សម្ភារៈដែលត្រូវការត្រូវបានរៀបចំតាមលក្ខណៈបច្ចេកទេសដែលបានផ្តល់ដោយ heliOS ។ សតិបណ្ដោះអាសន្ន ការវិភាគ និងក្រឡាត្រូវបានផ្ទុកទៅក្នុងឧបករណ៍ស្វ័យប្រវត្តិampឡឺ
  3. ការវាស់វែង និងការវិភាគទិន្នន័យ៖ ប្រព័ន្ធនេះអនុវត្តស៊េរីដែលបានកំណត់ពេលនៃការវាស់វែងអន្តរកម្មតាមពេលវេលាជាក់ស្តែងដោយស្វ័យប្រវត្តិដែលមិនត្រូវការអន្តរាគមន៍បន្ថែមពីអ្នកប្រើប្រាស់។ ទិន្នន័យអាចត្រូវបានវិភាគខណៈពេលដែលការវាស់ស្ទង់នៅតែដំណើរការ ដើម្បីទទួលបានការយល់ដឹងភ្លាមៗអំពីលទ្ធផល។

scIC Assays នៅក្នុង heliOS

បន្ថែមពីលើការវិភាគបង្កើតទិន្នន័យ កម្មវិធីក៏ផ្តល់នូវវិធីសាស្រ្តសម្រាប់ការធ្វើតេស្តបន្ទះឈីប ការសម្អាត និងការថែទាំឧបករណ៍ផងដែរ។

តារាងទី 1. ការវិភាគបង្កើតទិន្នន័យដែលបានផ្ទៀងផ្ទាត់

scIC Kinetics វាស់ kinetics ពេញលេញលើកោសិកាជាមួយនឹងការផ្សារភ្ជាប់វិភាគដែលអាចលៃតម្រូវបានរវាងកំហាប់ 1 និង 5 អមដោយការបែងចែកតែមួយបន្ទាប់ពីការប្រមូលផ្តុំខ្ពស់បំផុត។

ឆានែលពណ៌បៃតងឬក្រហម។ មានជម្រើសសម្រាប់តែការសាកល្បងវិភាគប៉ុណ្ណោះ។

scIC Kinetics - ពណ៌ពីរ វាស់ kinetics ពេញលេញលើកោសិកាជាមួយនឹងការផ្សារភ្ជាប់វិភាគដែលអាចលៃតម្រូវបានរវាងកំហាប់ 1 និង 5 អមដោយការបែងចែកតែមួយបន្ទាប់ពីការប្រមូលផ្តុំខ្ពស់បំផុត។ ឆានែលពណ៌បៃតង និងក្រហមបានបើកក្នុងពេលដំណាលគ្នា។ មានជម្រើសសម្រាប់តែការសាកល្បងវិភាគប៉ុណ្ណោះ។
ការបែងចែក scIC - ពណ៌ពីរ វាស់ការបំបែកនៃការវិភាគពីកោសិកាដែលត្រូវបានបង្កកំណើតជាមុនជាមួយនឹងការវិភាគដែលមានស្លាក fluorescently ជាមួយឆានែលពណ៌បៃតង និង/ឬក្រហម។

ការរៀបចំ និងការអភិវឌ្ឍន៍ការវិភាគសម្រាប់ការវាស់វែង scIC

មានចំណុចមួយចំនួនដែលត្រូវពិចារណាមុនពេលបង្កើតការវាស់វែង scIC

  • ការផ្តោតអារម្មណ៍វិភាគ កម្រិតនៃការដាក់ស្លាក លក្ខណៈសម្បត្តិ និងគុណភាព។
  • ដំណោះស្រាយធម្មតា និងថាមពលរំភើប។
  • គុណភាពនិងការគ្រប់គ្រងកោសិកា។

ការផ្តោតអារម្មណ៍វិភាគ និងកម្រិតនៃការដាក់ស្លាក

  • តាមការអនុវត្តការវាស់ស្ទង់ kinetic ស្តង់ដារ យើងសូមណែនាំឱ្យជ្រើសរើសជួរកំហាប់ម៉ូលេគុលវិភាគពី 0.1x ទៅ 10x ដែលជាការរំពឹងទុកនៃលំនឹង dissociation constant (Kd) សម្រាប់ kinetics កំហាប់ច្រើន។ សម្រាប់ kinetics ការផ្តោតអារម្មណ៍តែមួយ ឬការវាស់វែង dissociation ការផ្តោតអារម្មណ៍វិភាគគួរតែមានចន្លោះពី 1x និង 10x នៃ Kd ដែលរំពឹងទុក។ បរិមាណវិភាគដែលត្រូវការត្រូវបានគណនាសម្រាប់ពេលវេលាភ្ជាប់ 10 នាទីក្នុងអត្រាលំហូរ 25 µL/min សរុបប្រហែល 300 µL ។
  • សញ្ញាប័ត្រនៃការដាក់ស្លាក (DOL) សម្រាប់ការវិភាគគួរតែជា 1 តាមឧត្ដមគតិ ទោះបីជាតម្លៃ DOL នៃ 2 ឬ 3 នៅតែអាចទទួលយកបាន។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ត្រូវដឹងថាចំនួនស្លាកដែលខ្ពស់ជាងនៅលើការវិភាគអាចប៉ះពាល់ដល់លក្ខណៈសម្បត្តិនៃការចងរបស់វា ហើយអាចបង្កើនលទ្ធភាពនៃការប្រមូលផ្តុំឬការចងមិនជាក់លាក់។ ដើម្បីសម្រេចបាននូវ DOL ដ៏ល្អប្រសើរ សូមអនុវត្តតាមពិធីការដែលបានផ្តល់ជាមួយឧបករណ៍ដាក់ស្លាកដែលមានសារធាតុជ្រលក់ពណ៌ក្រហម ឬបៃតង ពីបន្ទាត់ប្រតិកម្ម heliXcyto ។
    ការធ្វើឱ្យមានលក្ខណៈធម្មតា។
  • Normalization គឺជាជំហានដំបូងនៅក្នុងវិធីសាស្រ្តបង្កើតទិន្នន័យទាំងអស់។ វាផ្តល់សំណងសម្រាប់ការប្រែប្រួលនៃសញ្ញាតិចតួចដែលបណ្តាលមកពីការប្រើឧបករណ៍រាវរកដាច់ដោយឡែកសម្រាប់កន្លែងវាស់នីមួយៗ។ នៅក្នុងជំហាននេះ ថ្នាំជ្រលក់ fluorescent នៅកំហាប់កំណត់ដោយអ្នកប្រើប្រាស់ត្រូវបានចាក់នៅពេលចាប់ផ្តើមនៃការវិភាគ។
  • ការផ្តោតអារម្មណ៍នៃដំណោះស្រាយធម្មតាត្រូវបានគណនាដោយគុណនឹងកំហាប់វិភាគដែលមានស្លាក fluorescently ខ្ពស់បំផុតដែលប្រើក្នុងការវាស់វែងដោយសញ្ញាប័ត្រនៃការដាក់ស្លាក (DOL) របស់អ្នកវិភាគ។ ការផ្តោតអារម្មណ៍នេះណែនាំថាមពលរំភើបរបស់ LED ដែលត្រូវបានអនុវត្តកំឡុងពេលវាស់។ គោលដៅគឺសម្រាប់កំពូលនៃដំណោះស្រាយ Normalization ដើម្បីឈានដល់ប្រហែលសញ្ញា fluorescence ដូចគ្នា។ amplitude ជាការផ្តោតអារម្មណ៍វិភាគខ្ពស់បំផុត។
  • សូមមើលតារាងកំហាប់ដំណោះស្រាយ Normalization ក្នុងការណែនាំសំខាន់ដើម្បីកំណត់តម្លៃដំបូង។ ចំណាំថាគំនូសតាងណែនាំការកំណត់ដំបូង ប៉ុន្តែថាមពលរំភើបរបស់ LED អាចត្រូវបានកែតម្រូវបន្ថែមទៀតក្នុងអំឡុងពេលបង្កើតការវិភាគ។

គុណភាព និងការរៀបចំកោសិកា

  • លទ្ធភាពជោគជ័យរបស់កោសិកាគួរតែលើសពី 95% ហើយជាទូទៅកោសិកាគួរតែស្ថិតក្នុងស្ថានភាពល្អ។ សម្រាប់កោសិកាដែលប្រកាន់ខ្ជាប់ យើងសូមណែនាំឱ្យធ្វើការជាមួយកោសិកាដែលមាន 50-70% ជាប់គ្នា។
  • សម្រាប់កោសិកាព្យួរ យើងណែនាំឱ្យប្រមូលផលនៅដំណាក់កាលពាក់កណ្តាលនៃការលូតលាស់។ 50 µl នៃការព្យួរកោសិកានៅ 1E + 06 កោសិកា/mL គឺត្រូវការជាចាំបាច់ក្នុងមួយដំណើរការ។

ការប្រមូលផលកោសិកាព្យួរ

  1. centrifuge ប្រហែល។ កោសិកា 2E+06 ក្នុងបរិមាណ 300 ក្រាម រយៈពេល 7 នាទី ដើម្បីលុបកោសិកាវប្បធម៌។ បោះបង់​មនុស្ស​លើស​ដើម។
  2. លាងសម្អាតកោសិកាម្តងដោយផ្អាកកោសិកាឡើងវិញក្នុងរង្វង់ប្រហែល។ 1 មីលីលីត្រនៃ DPBS ។ បញ្ចូល​ការ​ព្យួរ​នៅ​កម្រិត 400 ក្រាម​រយៈពេល 5 នាទី​ដើម្បី​បំប្លែង​កោសិកា​រស់។ បោះចោលដោយប្រុងប្រយ័ត្ន ដើម្បីយកបំណែក និងប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយចេញ។
  3. ផ្អាកឡើងវិញដោយថ្នមៗក្នុង 1 mL នៃ DPBS ផ្ទេរការព្យួរនៅលើកំពូលនៃ strainer កោសិកា និងសំពាធការព្យួរដោយលំហូរទំនាញ។
  4. វាស់​កំហាប់​កោសិកា​នៃ​ការ​ព្យួរ​ដែល​មាន​ភាព​តានតឹង និង​លៃតម្រូវ​ទៅ 1E+06 cells/ml ។
    • គន្លឹះ៖ កោសិកាព្យួរខ្លះមានទំនោរបង្កើតជាចង្កោម។ ផ្អាកចង្កោមឡើងវិញដោយថ្នមៗ និងរួមបញ្ចូលជំហានរឹតបន្តឹងមួយ មុនពេលជំហាន centrifugation ដំបូង។
    • ប្រើគន្លឹះបំពង់ដែលមានរន្ធធំទូលាយ នៅពេលដោះស្រាយការព្យួរកោសិកា ដើម្បីជៀសវាងកម្លាំងកាត់ខ្ពស់អំឡុងពេលផ្ទេរ ឬការផ្អាកឡើងវិញ។

ការប្រមូលផលកោសិកាជាប់គ្នា។

  1. លាងសម្អាតកោសិកាជាមួយ DPBS មាប់មគ។
  2. បំបែកកោសិកាចេញពីធុងដាំដុះដោយប្រើសារធាតុរំលាយសារធាតុដែលអ្នកពេញចិត្ត (ឧទាហរណ៍ TrypLE)។
  3. បន្ត​កោសិកា​ដែល​បែកខ្ញែក​ទៅ​ទំហំ​មេឌៀ​ដែល​ពេញចិត្ត​ហើយ​ត្រង​ជាមួយ​នឹង​ឧបករណ៍​ច្រោះ​កោសិកា 30 nm ។
  4. ជាជម្រើសបន្ថែម EDTA ក្នុងករណីកោសិកាដែលប្រកាន់ខ្ជាប់ខ្លាំង (កំហាប់ចុងក្រោយ 5 mM)។
  5. ច្របាច់កោសិកានៅកម្រិត 300 ក្រាមរយៈពេល 7 នាទីដើម្បីលុបកោសិកាវប្បធម៌។ បោះបង់​មនុស្ស​លើស​ដើម។
  6. បន្តកោសិកាទៅ 1 មីលីលីត្រនៃ DPBS ។
  7. វាស់កំហាប់កោសិកា និងលៃតម្រូវទៅ 1E+06 កោសិកា/មីលីលីត្រ។
    • គន្លឹះ៖ ប្រព័ន្ធផ្សព្វផ្សាយកោសិកាដែលពនឺ 1:4 ជាមួយ DPBS អាចត្រូវបានប្រើដើម្បីបន្ថែមសារធាតុចិញ្ចឹមទៅកោសិកាamples ក្នុងករណីមានកោសិការសើប ឬដំណើរការការងារយូរនៃការវិភាគ។

ការជួសជុលកោសិកា

  1. បញ្ចូលកោសិការហូតដល់ 10E+06 ក្នុងកម្រិត 300 ក្រាមរយៈពេល 7 នាទី ដើម្បីលុបកោសិកាវប្បធម៌។ បោះបង់​មនុស្ស​លើស​ដើម។
  2. ផ្អាកគ្រាប់កោសិកាឡើងវិញក្នុង 1 mL PBS, centrifuge និងបោះបង់ supernatant នេះ។
  3. ផ្អាកគ្រាប់កោសិកាឡើងវិញក្នុង 500 µL PBS/2% PFA (62.5 µL នៃដំណោះស្រាយ PFA 16% + 437.5 µL PBS)។
  4. ញាត់កោសិកានៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់រយៈពេល 10 នាទី (ដោយញ័រថ្នមៗ)។
  5. បន្ថែម 500 µL នៃ PBS និង centrifuge ការផ្អាកនៅ 400 ក្រាមសម្រាប់ 5 នាទីដើម្បីយក PFA ។
  6. បោះបង់​មនុស្ស​លើស​ដើម។
  7. ផ្អាកកោសិកាឡើងវិញក្នុង 1 mL PBS, ត្រងតាមរយៈ strainer កោសិកា 30 µm, centrifuge (400 ក្រាម, 5 នាទី) និងបោះបង់ supernatant ។
  8. ផ្អាកកោសិកាឡើងវិញក្នុងប្រហែល 1 mL នៃ PBS (ជាជម្រើស៖ លៃតម្រូវទៅកំហាប់ចុងក្រោយនៃ 5E+06 cells/mL)។
  9. ទុកកោសិកាថេរនៅសីតុណ្ហភាព 2-8°C ប្រើក្នុងរយៈពេលមួយខែ។
    • ប្រសិនបើក្រឡាបន្ថែមទៀតគួរតែត្រូវបានជួសជុល សូមធ្វើមាត្រដ្ឋានចំនួនទាំងអស់ទៅតាមនោះ។
    • ចំណាំ៖ ល្បឿន centrifugation កំឡុងពេលប្រមូលផលកោសិកាអាចត្រូវបានកែតម្រូវទៅតាមប្រភេទកោសិកា ប្រសិនបើកោសិកាមានភាពរសើប ហើយកម្លាំង g ទាបត្រូវបានប្រើជាទូទៅ។
    • កំហាប់ PFA អាចប្រែប្រួលចន្លោះពី 0.5 ទៅ 4% ។

ការដំឡើង scIC Assay

ការវិភាគ scIC ខាងក្រោមគួរតែត្រូវបានរួមបញ្ចូលនៅក្នុងការអភិវឌ្ឍន៍ការធ្វើតេស្ត ហើយអាចត្រូវបានធ្វើម្តងទៀតនៅក្នុងលំហូរការងារនៃការវិភាគនៅពេលក្រោយ។

លំហូរការងារអភិវឌ្ឍន៍ការវិភាគត្រូវបានបែងចែកជា 3 ជំហានជាប់ៗគ្នា៖

  1. ការធ្វើតេស្តបន្ទះឈីបស៊ីតូ
  2. វិភាគតែតេស្តប៉ុណ្ណោះ។
  3. ការវិភាគជីវវិទ្យា

តេស្ត Cyto Chip

  • គុណភាពនៃបន្ទះឈីបថ្មីចាំបាច់ត្រូវវាយតម្លៃ មុនពេលប្រើបន្ទះឈីប cyto ក្នុងការវាស់វែង។ ចាប់ផ្តើមដោយដំណើរការការធ្វើតេស្ត Cyto Chip ដោយឡែកពីគ្នា។ សូមមើលជំពូកបន្ទះឈីប Helix cyto នៅក្នុងការណែនាំចម្បងអំពីរបៀបដំឡើង និងវាយតម្លៃការធ្វើតេស្តបន្ទះឈីប។

វិភាគតែតេស្តប៉ុណ្ណោះ។

  • ការអភិវឌ្ឍន៍នៃការវិភាគ scIC ចាប់ផ្តើមជាមួយនឹងការធ្វើតេស្តវិភាគតែប៉ុណ្ណោះ ដែលវាយតម្លៃឥរិយាបថនៃការវិភាគដែលមានស្លាក fluorescently នៅលើផ្ទៃបន្ទះឈីបថ្មីដោយគ្មានកោសិកា។
  • ការធ្វើតេស្តនេះក៏អាចត្រូវបានធ្វើម្តងទៀតជាទៀងទាត់ដើម្បីវាយតម្លៃស្ថេរភាពនៃការវិភាគដែលមានស្លាក។ scIC Analyte Only Test អាច​ត្រូវ​បាន​កំណត់​រចនាសម្ព័ន្ធ​ក្នុង Kinetics assay ដោយ​បើក​ប្រអប់​ធីក​តែ Analyte នៅ​ក្រោម​ការ​កំណត់​ក្រឡា។
  • សម្រាប់ការវាយតម្លៃគុណភាពនៃការវិភាគ ការផ្តោតអារម្មណ៍ដែលបានប្រើខ្ពស់បំផុតគឺគ្រប់គ្រាន់ ហើយអាចត្រូវបានកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធដោយការបិទសមាគមទាំងអស់ លើកលែងតែសមាគមមួយនៅក្នុងការវិភាគ។

ការរៀបចំលំហូរការងាររបស់ Kinetics Assay

  • ការវិភាគ kinetics ជាធម្មតាត្រូវបានប្រើប្រាស់នៅក្នុងលំហូរការងារដោយស្វ័យប្រវត្តិដែលមានទាំងការវិភាគបង្កើតទិន្នន័យ ក៏ដូចជាធាតុថែទាំផងដែរ។ នៅពេលដែលអ្នកវិភាគបានឆ្លងកាត់ការត្រួតពិនិត្យគុណភាពតែប៉ុណ្ណោះ ការវិភាគវាអាចត្រូវបានប្រើក្នុងការវាស់វែងនៅលើកោសិកា។
  • To quantify kinetic rates reliably, the signal response during association should be concentration-dependent, increasing with higher analyte concentrations.
  • ការផ្តោតអារម្មណ៍ខ្ពស់បំផុតគួរតែឈានដល់ខ្ពង់រាបមួយដែលបង្ហាញថាការចងជាប់នឹងស្ថានភាពត្រូវបានសម្រេច។ ការបែកខ្ញែកត្រូវតែដំណើរការយូរល្មមដើម្បីស្រាយផ្នែកសំខាន់នៃការវិភាគដែលចងភ្ជាប់ (ច្រើនជាង 5%) ដើម្បីបើកការសមដែលអាចទុកចិត្តបាននៃខ្សែកោង។
  • ប្រើប៉ារ៉ាម៉ែត្រលំនាំដើមនៅក្នុងលក្ខខណ្ឌនៃការវិភាគជាចំណុចចាប់ផ្តើម ហើយកែសម្រួលបន្ថែមទៀតអាស្រ័យលើលទ្ធផលរបស់អ្នក។

Example 1. លំហូរការងារនៃការវិភាគដែលបានណែនាំ

លំហូរការងារនៃការវិភាគអនុញ្ញាតឱ្យអ្នកប្រើប្រាស់តម្រង់ជួរក្នុងការវាស់វែង និងវិធីសាស្ត្រថែទាំដោយផ្អែកលើតម្រូវការពិសោធន៍ជាក់លាក់របស់ពួកគេ។

លំហូរការងារនៃការវិភាគអាចរួមបញ្ចូលជំហានខាងក្រោមនៅក្នុងលំដាប់ដែលបានចង្អុលបង្ហាញ៖

  1. Prime (បន្ទះឈីបថែទាំ)
  2. scIC Kinetics (Cells A, Analyte A, Cyto chip)
  3. ការលាងសម្អាតប្រព័ន្ធ (បន្ទះឈីបថែទាំ)
  4. scIC Kinetics (Cells B, Analyte A, Cyto chip)
  5. ការលាងសម្អាតប្រព័ន្ធ (បន្ទះឈីបថែទាំ)
  6. ការវិភាគដែលបានកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធ scIC Kinetics តែប៉ុណ្ណោះ (វិភាគ A, Cyto chip)
    • ជំហាន Prime និង System Wash ត្រូវបានអនុវត្តនៅលើ Maintenance Chip។ ការលាងសម្អាតប្រព័ន្ធត្រូវបានរួមបញ្ចូលនៅពេលប្តូរទៅបន្ទាត់ក្រឡាផ្សេង និងមុនពេលធ្វើតេស្តវិភាគតែប៉ុណ្ណោះនៅចុងបញ្ចប់នៃលំហូរការងារ។
    • សម្រាប់ព័ត៌មានលម្អិត សូមមើលផ្នែកនៅលើការលាងសម្អាតប្រព័ន្ធ Cyto នៅក្នុងការណែនាំចម្បង។
    • នៅពេលដាក់ជួរនៃការវិភាគ kinetics លើកោសិកា សូមពិចារណាលទ្ធភាពជោគជ័យរបស់កោសិកា ដែលអាស្រ័យលើបន្ទាត់កោសិកា។
    • សម្រាប់បន្ទាត់កោសិការសើប វាត្រូវបានផ្ដល់អនុសាសន៍ឱ្យដំណើរការតែ 1-2 ការវិភាគប៉ុណ្ណោះក្នុងមួយលំហូរការងារនៃការវិភាគ។ សម្រាប់បន្ទាត់កោសិកាដែលមានភាពធន់ជាងមុន ការវិភាគបន្ថែមអាចត្រូវបានតម្រង់ជួរ។
    • ចំណាំ៖ សម្រាប់ការវិភាគបន្ថែម សូមរៀបចំដំណោះស្រាយកោសិកានៅក្នុងដបដាច់ដោយឡែកដោយដាក់ឈ្មោះកោសិកាខុសៗគ្នា។
    • ត្រូវប្រាកដថាសារធាតុ reagents ទាំងអស់ស្រស់ និងត្រងតាមរយៈតម្រង 0.22 µm។ ជាចុងក្រោយ ដាក់សារធាតុដែលត្រៀមរួចជាស្រេចទៅក្នុងឧបករណ៍ ដូចដែលបានណែនាំដោយ heliOS។
    • ការរត់អាចត្រូវបានចាប់ផ្តើមដោយចុចលើសញ្ញាព្រួញពណ៌ខៀវ "រត់" ហើយធ្វើតាមជំហាននៅក្នុង Assay Start Wizard ។
    • នៅពេលដែលដំណើរការបានចាប់ផ្តើម ឧបករណ៍ដំណើរការដោយឯករាជ្យរហូតដល់ដំណើរការការងារនៃការវិភាគទាំងមូលត្រូវបានបញ្ចប់។

ការវិភាគការពិសោធន៍ scIC

scIC លំហូរការងារវិភាគ

  • ទិន្នន័យ scIC អាចខុសពីទិន្នន័យ biosensor ស្តង់ដារ ដោយសារភាពស្មុគស្មាញធម្មជាតិនៃព្រឹត្តិការណ៍ដែលកើតឡើងនៅលើកោសិកាដែលចាប់យកនៅលើផ្ទៃបន្ទះឈីប heliXcyto ដែលអាចបណ្តាលឱ្យមានភាពមិនប្រក្រតីនៃ sensorgram ។
  • ដូច្នេះ ការត្រួតពិនិត្យគុណភាពត្រូវបានសង្កត់ធ្ងន់សម្រាប់រូបភាពដែលបានថតនៅជំហានរង្វាស់នីមួយៗ និងសម្រាប់ sensorgrams ដែលបានបង្កើតនៅក្នុងទំព័រចុះចតនៃការវិភាគដោយស្វ័យប្រវត្តិ។
  • លើសពីនេះទៀត heliOS ផ្តល់នូវឧបករណ៍ដើម្បីដោះស្រាយភាពមិនប្រក្រតីរបស់ sensorgram កំឡុងពេលវិភាគទិន្នន័យដោយដៃ scIC ។

ដំណើរការវិភាគទិន្នន័យ scIC៖

  1. ការត្រួតពិនិត្យរូបភាព៖
    • ពិនិត្យរូបភាពទាំងអស់ដែលបានថតនៅទូទាំងការវាស់វែង (ផ្ទាំងរូបភាពនៅក្នុងបង្អួចពិសោធន៍)។
    • តើកោសិកាចំនួនប៉ុន្មាននៅតែស្ថិតស្ថេរក្នុងអន្ទាក់ជុំវិញការវាស់វែងទាំងមូល?
    • តើអ្វីទៅជាស្ថានភាពនៃកោសិកា? ពិនិត្យ​មើល​ភាព​ក្រឡា និង​ភាព​រឹង​មាំ។
    • តើអន្ទាក់ស្អាតបន្ទាប់ពីដំណាក់កាលបង្កើតឡើងវិញទេ?
  2. ការត្រួតពិនិត្យទិន្នន័យឆៅ៖
    • ពិនិត្យទិន្នន័យឆៅសម្រាប់ចំណុចយោងទី 1 និងចំណុចវាស់វែងទី 2
    • សញ្ញានៃកំពូលនៃការធ្វើឱ្យធម្មតាគួរតែនៅជិត ឬខ្ពស់ជាងសញ្ញាទិន្នន័យឆៅខ្ពស់បំផុត។
    • តើ​សញ្ញា​ត្រឡប់​ទៅ​កម្រិត​មូលដ្ឋាន​នៅ​ចំណុច​ទាំង​ពីរ​ឬ​ក៏​មាន​ភស្តុតាង​នៃ​ការ​ចង​មិន​ជាក់លាក់?
  3. ការត្រួតពិនិត្យទិន្នន័យធម្មតា៖
    • តើ​ការ​ចាក់​ថ្នាំ​លោត​លើ​ចំណុច​ទី​១ និង​ចំណុច​ទី​២ ត្រួត​លើ​គ្នា​ត្រឹមត្រូវ​ឬ​ទេ?
  4. ការត្រួតពិនិត្យទិន្នន័យយោង៖
    • តើ​ជំហាន​បង្កើត​ឡើង​វិញ​នាំ​សញ្ញា​ត្រឡប់​ទៅ​បន្ទាត់​មូលដ្ឋាន​ឬ? បើមិនដូច្នោះទេ សូមពិនិត្យមើលថាតើមានកោសិកា ឬកំទេចកំទីនៅក្នុងអន្ទាក់បន្ទាប់ពីការបង្កើតឡើងវិញដោយ reviewនៅក្នុងរូបភាព។
    • តើមានការកើនឡើង ចំនុចខាងក្រៅ ឬភាពមិនប្រក្រតីផ្សេងទៀតនៅក្នុងខ្សែកោងដែលយោងឬ? បើដូច្នេះមែនview រូបភាពដើម្បីកំណត់មូលហេតុដែលអាចកើតមាន និងពិចារណាការកែតម្រូវដោយដៃ។
  5. ពិនិត្យសមទិន្នន័យ៖
    • អនុវត្តការវាយតម្លៃគុណភាពដែលមើលឃើញ
    • តើ​សម​ពណ៌នា​យ៉ាង​ត្រឹមត្រូវ​អំពី​ឥរិយាបថ​នៃ​ខ្សែកោង ឬ​តើ​បន្ទាត់​សម​ឆ្លងកាត់​ឧបករណ៍​ចាប់សញ្ញា​ឬ?
    • តើសមត្រឹមត្រូវពិពណ៌នាអំពីភាពកោងនៃទិន្នន័យដែរឬទេ?
    • គឺ amplitude ស្របតាមទិន្នន័យដែលបានយោង?

scIC ការវិភាគទិន្នន័យស្វ័យប្រវត្តិ

  • ការវិភាគដោយស្វ័យប្រវត្តិរបស់ scIC ដំណើរការទិន្នន័យឆៅទៅជាផែនការត្រួតពិនិត្យគុណភាព និងទិន្នន័យដែលសមស្របដោយគ្រាន់តែចុចពីរបីដងប៉ុណ្ណោះ។
    1. បើកការពិសោធន៍ scIC ដោយចុចពីរដងលើការពិសោធន៍ដែលបានជ្រើសរើសក្នុងបញ្ជីពិសោធន៍
    2. ចុចប៊ូតុងវិភាគពណ៌ខៀវធំនៅខាងក្រោមផ្ទាំងពិសោធន៍។
    3. ពីលំហូរការងារពិសោធន៍ ជ្រើសរើសការវាយតម្លៃដែលអ្នកចង់វិភាគ។
    4. ជ្រើសរើស Kinetics scIC ពីប្រភេទការវិភាគដែលមាន ហើយចុច Next។
      • ចំណាំ៖ ប្រសិនបើការពិសោធន៍នៅតែដំណើរការ មានតែការវិភាគដែលបានបញ្ចប់ប៉ុណ្ណោះនឹងត្រូវបានបង្ហាញនៅក្នុងបញ្ជី។ នៅពេលដែលការវាយតម្លៃត្រូវបានជ្រើសរើស បង្អួចបន្ទាប់នឹងបង្ហាញប្រភេទការវិភាគដែលមានទាំងអស់ ជាក់លាក់ចំពោះវិធីសាស្ត្រ/ការវិភាគដែលបានប្រើ។
    5. ប្រសិនបើចាំបាច់ កំណត់រចនាសម្ព័ន្ធការវិភាគនៅក្នុងបង្អួចខាងក្រោម។ គំរូសមតាមលំនាំដើមគឺ “Kinetics – Free end level” ជាមួយនឹងប្រអប់ធីក “Force fit end level to Zero” ត្រូវបានធ្វើឱ្យសកម្ម។ ងាកចេញពីគំរូនេះលុះត្រាតែជីវវិទ្យា ឬទិន្នន័យទាមទារការពិពណ៌នាស្មុគស្មាញជាង។
    6. នៅពេលដែលការកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធត្រូវបានបញ្ចប់ សូមចុច វិភាគ ដើម្បីមើលរូបថតដែលបានមកទាំងអស់ ឧបករណ៏ចាប់សញ្ញាឆៅ និងកែច្នៃ និងតម្លៃ kinetics ។
  • ដោយសារតែភាពស្មុគស្មាញនៃធម្មជាតិamples ប្រើសម្រាប់ scIC assays លទ្ធផល sensorgrams អាចមានភាពមិនប្រក្រតី។
  • ដើម្បីដោះស្រាយបញ្ហានេះ ការត្រួតពិនិត្យគុណភាពនៃរូបភាព និងឧបករណ៍ចាប់សញ្ញាត្រូវបានសង្កត់ធ្ងន់នៅក្នុងការវិភាគដោយស្វ័យប្រវត្តិ។
  • ប្រសិនបើការកែតម្រូវដោយដៃ ឬការវិភាគស៊ីជម្រៅបន្ថែមទៀតត្រូវបានទាមទារ ឧបករណ៍សម្រាប់ការកែតម្រូវវត្ថុបុរាណត្រូវបានផ្តល់ជូននៅក្នុង Scratchpad ការវិភាគដោយដៃ។

heliXcyto ការថែទាំ និងកំចាត់មេរោគ

  • ការថែទាំ heliXcyto គឺចាំបាច់ដើម្បីធានាបាននូវដំណើរការល្អបំផុត និងអាយុកាលយូរនៃឧបករណ៍។ ការថែទាំជាប្រចាំរួមមាននីតិវិធីសម្អាតដែលការពារការចម្លងរោគ និងរក្សាបាននូវភាពសុចរិតនៃប្រព័ន្ធ ធ្វើឱ្យមានលទ្ធផលត្រឹមត្រូវ និងដំណើរការរលូន។ ការថែទាំជាប់លាប់គឺមានសារៈសំខាន់សម្រាប់ភាពជឿជាក់នៃឧបករណ៍ និងគុណភាពនៃលទ្ធផលពិសោធន៍។
    ការថែទាំ heliXcyto មាននីតិវិធីសំខាន់ៗចំនួនពីរ៖ Cyto System Wash ដែលអាចបញ្ចូលដោយផ្ទាល់ទៅក្នុងដំណើរការវិភាគ និង Clean & Sleep ដែលត្រូវបានអនុវត្តជាទម្លាប់ដាច់ដោយឡែក ដើម្បីរក្សាឧបករណ៍ឱ្យនៅខាងស្ដាំមុនពេលប្រើប្រាស់ បន្ទាប់ពីការវាស់វែងពេញមួយយប់ពីមុន ឬនៅពេលមិនប្រើលើសពី 2 ថ្ងៃ។
  • ទាំង System Wash និង Clean & Sleep ទាមទារឱ្យមានវត្តមាននៃបន្ទះឈីបថែទាំ heliX® នៅក្នុងបន្ទះបន្ទះឈីប។

ទម្លាប់សម្អាត និងគេង

  • ទម្លាប់នៃការសម្អាត និងគេងគឺសំដៅលើការសម្អាត និងការបិទ/កន្លែងផ្ទុកឧបករណ៍។ វិធីសាស្ត្រនេះ លាងជម្រះបំពង់រាវរបស់ឧបករណ៍ heliX® ជាមុនសិនជាមួយនឹងទឹកសុទ្ធ ហើយបន្ទាប់មកជាមួយនឹងអេតាណុល 70% ។ ទីបំផុតបំពង់ទាំងអស់ត្រូវបានបញ្ចេញដោយខ្យល់។
  • នីតិវិធីសម្អាតនេះគឺដោយស្វ័យប្រវត្តិយ៉ាងពេញលេញ និងចំណាយពេលប្រហែល 40 នាទី។ ក្នុងអំឡុងនីតិវិធី អេតាណុលត្រូវបានច្រានចូលទៅក្នុងដបទឹក ដូច្នេះមាតិកានៃដបគួរត្រូវបោះចោលនៅពេលក្រោយ។
  • បន្ទាប់ពីសម្អាត & គេង ឧបករណ៍ចូលទៅក្នុងរបៀបគេង និងមិនអាចប្រើបានរហូតដល់ការភ្ញាក់ឡើង & Prime ត្រូវបានអនុវត្ត។ ឈីបថែទាំ heliX® ត្រូវបានទាមទារសម្រាប់ការរត់ទាំងពីរ។
  • សំខាន់៖ ដើម្បីបងា្ករការចម្លងរោគបំពង់ ត្រូវប្រាកដថាត្រូវបោះចោលមាតិកានៃដបទឹក (ល្បាយទឹក/អេតាណុល) ហើយលុបធុងកាកសំណល់ចោលបន្ទាប់ពីនីតិវិធីសម្អាត។

ការបិទនិងការផ្ទុករយៈពេលវែង

  • សម្រាប់រយៈពេលយូរនៃការមិនប្រើប្រាស់ សូមដកដបដែលមានទឹក និងអេតាណុលចេញ បន្ទាប់ពីនីតិវិធី Clean & Sleep ចេញពីធុងសតិបណ្ដោះអាសន្ន ហើយទុកបំពង់នោះឱ្យប៉ះនឹងខ្យល់។
  • យកបន្ទះឈីបថែទាំheliX® ហើយរក្សាទុកក្នុងថង់ដើមរបស់វា។ នេះការពារលំហូរត្រឡប់មកវិញ និងការចម្លងរោគ។ បិទឧបករណ៍។

ការលាងសម្អាតប្រព័ន្ធស៊ីតូ

  • heliXcyto System Wash សម្អាតប្រព័ន្ធមីក្រូហ្វ្លុយឌីកយ៉ាងទូលំទូលាយដោយប្រើ Cleaning Solution 3 (CS3) ក្នុងរយៈពេលប្រហែល 45 នាទី។ CS3 ត្រូវបានជ្រើសរើសជាពីរ stages. ម្ជុលទីមួយ និង សample loop ត្រូវបានបំពេញ និង incubated ដើម្បីលុបភាពកខ្វក់ណាមួយ។
  • ចំណាំ៖ ដំណើរការ Cyto System Wash យ៉ាងហោចណាស់ជារៀងរាល់ថ្ងៃ នៅពេលដែលឧបករណ៍កំពុងប្រើប្រាស់។ យើងសូមផ្តល់អនុសាសន៍ឱ្យបន្ថែមវិធីសាស្ត្រ Cyto System Wash ទៅក្នុងលំហូរការងារនៃការវិភាគមួយបន្ទាប់ពីការធ្វើតេស្តនីមួយៗ (នៅពេលប្តូរទៅបន្ទាត់ក្រឡាថ្មី ឬប្រសិនបើ sampគុណភាពគឺល្អបំផុត) ឬដល់ចុងបញ្ចប់នៃដំណើរការការងារវិភាគ។ ការផ្លាស់ប្តូរបន្ទះឈីបថែទាំបន្ទាប់ពីការលាងសម្អាតប្រព័ន្ធ Cyto អតិបរមាចំនួន 50 ត្រូវបានបង្ហាញជាចំនួននៃការបង្កើតឡើងវិញនៅក្នុងបន្ទះ Chip view នៃការគ្រប់គ្រងឧបករណ៍។

ទំនាក់ទំនង

  • ថាមវន្ត Biosensors GmbH
  • Perchtinger Str. ៨/១០
  • 81379 ទីក្រុង Munich
  • អាល្លឺម៉ង់
  • Bruker Scientific LLC
  • ផ្លូវ 40 Manning, Manning Park
  • Billerica, MA 01821

សហរដ្ឋអាមេរិក

  • ព័ត៌មានបញ្ជាទិញ order.biosensors@bruker.com
  • ជំនួយបច្ចេកទេស support.dbs@bruker.com
  • www.dynamic-biosensors.com
  • ឧបករណ៍ និងបន្ទះសៀគ្វីត្រូវបានវិស្វកម្ម និងផលិតនៅប្រទេសអាល្លឺម៉ង់។
  • © 2025 Dynamic Biosensors GmbH
  • សម្រាប់ការប្រើប្រាស់ស្រាវជ្រាវតែប៉ុណ្ណោះ។ មិនមែនសម្រាប់ប្រើក្នុងនីតិវិធីវិនិច្ឆ័យរោគទេ។

សំណួរគេសួរញឹកញាប់

សំណួរគេសួរញឹកញាប់ scIC

តើខ្ញុំអាចប្រើបន្ទះឈីប heliXcyto ឡើងវិញបានទេ?

បាទ បន្ទះឈីប heliXcyto គឺអាចប្រើឡើងវិញបាន និងអាចចោលបាន។ អនុវត្តតាមការណែនាំអំពីការសម្អាត និងការផ្ទុកត្រឹមត្រូវ។

តើ Maintenance Chip មានគោលបំណងអ្វី?

Maintenance Chip ត្រូវបានប្រើសម្រាប់ការសម្អាត ការធ្វើតេស្ត និងប្រតិបត្តិការថែទាំ ដើម្បីធានាបាននូវដំណើរការត្រឹមត្រូវនៃប្រព័ន្ធ។

តើខ្ញុំគួរសម្អាតឧបករណ៍ញឹកញាប់ប៉ុណ្ណា?

ប្រព័ន្ធរាវនៃ heliXcyto ត្រូវបានរក្សាទុកយ៉ាងស្អាតជាមួយនឹងវិធីសាស្រ្ត Cyto System Wash និង Clean & Sleep ។ ប្រព័ន្ធ microfluidic ត្រូវបានណែនាំអោយសម្អាតតាមរយៈ Cyto System Wash នៅលើ Maintenance Chip បន្ទាប់ពីការវិភាគនីមួយៗ (ជាពិសេសនៅពេលផ្លាស់ប្តូរប្រភេទកោសិកា) ឬចុងក្រោយបំផុតនៅចុងបញ្ចប់នៃដំណើរការការងារនៃការវិភាគ។ នីតិវិធី Clean&Sleep គឺត្រូវអនុវត្តមុនពេលប្រើប្រាស់បន្ទាប់ពីការវាស់វែងពីមុន (ឧទាហរណ៍នៅពេលព្រឹកបន្ទាប់ពីការពិសោធន៍ពេញមួយយប់) ឬនៅពេលដែល heliXcyto នឹងមិនប្រើប្រាស់លើសពី 2 ថ្ងៃ។

តើដំណោះស្រាយអាចរក្សាទុកបានយូរប៉ុណ្ណា៖ RB 1 / water / CS 1 / CS 3 / Normalization solution ត្រូវបានរក្សាទុកក្នុងឧបករណ៍?

ជាទូទៅ មុននឹងធ្វើការវាស់វែងនីមួយៗ ដំណោះស្រាយទាំងអស់ត្រូវពិនិត្យមើលបរិមាណដែលនៅសល់ និងសម្រាប់ភាពច្របូកច្របល់ ឬទឹកភ្លៀងដែលអាចកើតមាន។ ក្នុងករណីបែបនេះ ដំណោះស្រាយចាំបាច់ត្រូវផ្លាស់ប្តូរភ្លាមៗ។ ទឹក និង RB 1 នឹងត្រូវជំនួសជារៀងរាល់ថ្ងៃ ហើយ RB 1 ត្រូវត្រងមុនពេលវាស់នីមួយៗ។ ដំណោះ​ស្រាយ​ធម្មតា​ដែល​រលាយ​អាច​ប្រើ​បាន​២​ថ្ងៃ​ជាប់​គ្នា។ ដំណោះស្រាយលាងសម្អាតមានស្ថេរភាពប្រហែល 3 ថ្ងៃ។

តើខ្ញុំអាចប្រើបន្ទះឈីប heliXcyto បានរយៈពេលប៉ុន្មាន?

កាលបរិច្ឆេទផុតកំណត់នៃបន្ទះឈីប heliXcyto អាចត្រូវបានពិនិត្យនៅក្នុងផ្ទាំងបន្ទះ Chip នៅក្នុងផ្នែកឧបករណ៍នៅក្នុង heliOS ។ គ្មានការធានាសម្រាប់ភាពត្រឹមត្រូវនៃបន្ទះឈីបអាចត្រូវបានផ្តល់ឱ្យបន្ទាប់ពីកាលបរិច្ឆេទផុតកំណត់។ ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ដរាបណាអន្ទាក់នៅតែមានស្ថេរភាព ផ្ទៃគឺស្អាត ហើយផ្ទៃខាងក្រោយ fluorescence ស្ថិតនៅក្រោមការកាត់ដែលបានបញ្ជាក់នៅក្នុង Chip Test បន្ទះឈីបនេះត្រូវបានគេចាត់ទុកថាអាចប្រើបានសម្រាប់ការវាស់វែង។ ការសម្អាតបន្ទះឈីបខាងក្រៅជាទៀងទាត់ (ឧបករណ៍សម្អាតបន្ទះឈីប CCK-1-1 ត្រូវបានណែនាំអោយធ្វើបន្ទាប់ពីការប្រើប្រាស់បន្ទះឈីប ដើម្បីពន្យារអាយុកាលរបស់បន្ទះឈីបយ៉ាងខ្លាំង។

តើខ្ញុំអាចប្រើប្រាស់បន្ទះឈីប Maintenance បានរយៈពេលប៉ុន្មាន?

បន្ទះឈីប Maintenance គឺតម្រូវឱ្យជំនួសបន្ទាប់ពីការលាងប្រព័ន្ធចំនួន 50 (រាប់ថាជាការបង្កើតឡើងវិញនៅក្នុងផ្ទាំង Chip tray នៃការគ្រប់គ្រងឧបករណ៍នៅក្នុង heliOS)។

តើការធ្វើតេស្តបន្ទះឈីប heliXcyto ត្រូវធ្វើញឹកញាប់ប៉ុណ្ណា?

Chip Test ប្រមូលព័ត៌មានអំពីផ្ទៃខាងក្រោយ fluorescence ភាពស្អាត និងសុចរិតភាពនៃបន្ទះឈីប មុនពេលចាប់ផ្តើមការពិសោធន៍ថ្មី។ វាត្រូវបានអនុវត្តយ៉ាងហោចណាស់ម្តងនៅពេលដែលបន្ទះឈីបថ្មីកំពុងត្រូវបានប្រើប្រាស់ ប៉ុន្តែត្រូវបានណែនាំអោយធ្វើមុន ឬនៅដើមនៃការពិសោធន៍នីមួយៗ ដើម្បីពិនិត្យមើលស្ថានភាពរបស់បន្ទះឈីប។ នេះអនុញ្ញាតឱ្យលក្ខខណ្ឌរង្វាស់ត្រូវបានកែតម្រូវ និងភាពមិនប្រក្រតីនៅក្នុង sensorgrams ដែលត្រូវតាមដានទៅលើបន្ទះឈីប ឬឧបករណ៍។

តើ​អ្វី​ទៅ​ជា​គីមីវិទ្យា​វិភាគ​ស្លាក?

ថ្នាំលាប fluorescent ពណ៌ក្រហម ឬបៃតង ត្រូវបានផ្សំដោយឧបករណ៍ដាក់ស្លាករបស់យើងតាមរយៈ NHS-esters ទៅនឹងសារធាតុ amines បឋមនៅក្នុងការវិភាគប្រូតេអ៊ីន (ឧទាហរណ៍ lysines ឬ N-terminus)។ ព័ត៌មានលម្អិត និងផ្នែកដោះស្រាយបញ្ហាអាចរកបាននៅក្នុង HeliXcyto Labeling Kit red dye (Labeling Kit red dye 2 CY-LK-R2-1) និង heliXcyto Labeling Kit green dye (Labeling Kit green dye CY-LK-G1-1) សៀវភៅដៃពីរបស់យើង webហាង។

កន្លែងដែលត្រូវស្វែងរកព័ត៌មានបញ្ជាក់អត្តសញ្ញាណ និងអាជ្ញាប័ណ្ណ heliOS?

ដំណើរការនៃការបញ្ចូលព័ត៌មានអត្តសញ្ញាណ និងអាជ្ញាប័ណ្ណត្រូវបានពិពណ៌នានៅក្នុងផ្នែកការដំឡើង heliOS នៅក្នុងការណែនាំអំពី heliXcyto ពីរបស់យើង webគេហទំព័រ (ការណែនាំអំពី heliXcyto) ។ ព័ត៌មានអាជ្ញាប័ណ្ណរបស់អ្នកគួរតែត្រូវបានរក្សាទុកនៅក្នុងថត scIC នៅលើ heliXcyto PC Desktop ដែលអ្នកឯកទេសកម្មវិធីរបស់យើងបានបង្កើតកំឡុងពេលបណ្តុះបណ្តាល។

តើ​អ្វី​ទៅ​ជា​កម្រិត​រំភើប/បំភាយ​នៃ heliXcyto ?

ការរំភើបជាពណ៌ក្រហមគឺ 605-625 nm ការបំភាយ (ការរកឃើញ) គឺ 655-685 nm ។ ការរំភើបនៅក្នុងពណ៌បៃតង 490-510 nm ការបំភាយពណ៌បៃតងគឺ 525-575 nm ។

តើខ្ញុំត្រូវវាស់ស្ទង់ការពិសោធន៍ដូចគ្នាប៉ុន្មានដងសម្រាប់ភាពជឿជាក់នៃស្ថិតិ?

ដើម្បីសម្រេចបាននូវអត្រា kinetic ជាមធ្យមដែលអាចទុកចិត្តបាន ការធ្វើដដែលៗ 3-4 នៃការវាស់វែង 3-concentration Kinetics ត្រូវបានណែនាំអោយធ្វើនៅក្នុងចំនួនកោសិកាដូចគ្នា។ នៅក្នុងសំណុំទិន្នន័យស្របគ្នា អត្រាការផ្សារភ្ជាប់ និងការផ្តាច់ទំនាក់ទំនងនៃអ្នកចម្លងគួរតែនៅក្នុងបង្អួច 2-4 ដង។

តើអ្វីជាភាពប្រែប្រួលនៃការវាស់វែង scIC?

ដែនកំណត់នៃការរកឃើញទាបនៅក្នុងលក្ខខណ្ឌនៃកន្សោមគោលដៅគឺអាស្រ័យលើការដាក់ស្លាកវិភាគ ប៉ុន្តែជាធម្មតា scIC អាចវាស់ kinetics រួចហើយនៅលើម៉ូលេគុល 1000-10000 ក្នុងមួយកោសិកា។ ដើម្បីបង្កើនភាពរសើប យ៉ាងហោចណាស់កោសិកា 5 ត្រូវបានណែនាំអោយចាប់យក ហើយវិភាគ DOL ពី 5-10 និងថាមពល LED នឹងមានតុល្យភាពដើម្បីសម្រេចបាននូវចំនួនហ្វ្លុយអូរីសអតិបរមា។

តើអ្វីជាដែនកំណត់នៃការរកឃើញរបស់ heliXcyto ទាក់ទងនឹងអត្រា kinetic?

សូមយោងទៅលើលក្ខណៈបច្ចេកទេសនៃ heliXcyto សម្រាប់ដែនកំណត់បច្ចេកទេសដែលទាន់សម័យបំផុត ដែលអាចត្រូវបានរកឃើញនៅក្នុងការណែនាំរបស់ heliXcyto (មគ្គុទ្ទេសក៍ heliXcyto) ។ Dissociation constant Kd: 10 pM ទៅ 1 mM អត្រាសមាគមថេរ kon: 1E3 ដល់ 1E7 M-1s-1 អត្រាផ្តាច់ទំនាក់ទំនងថេរ: 1E-6 ទៅ 1 s-1 សម្រាប់ព័ត៌មានលម្អិតសូមពិនិត្យមើលការណែនាំរបស់ heliXcyto របស់យើងពី webគេហទំព័រ។

ឯកសារ/ធនធាន

ថាមវន្ត BIOSENSORS heliX cyto ប្រព័ន្ធវិភាគមន្ទីរពិសោធន៍ស្វ័យប្រវត្តិពេញលេញ [pdf] សៀវភៅណែនាំអ្នកប្រើប្រាស់
heliX cyto ប្រព័ន្ធវិភាគមន្ទីរពិសោធន៍ស្វ័យប្រវត្តិពេញលេញ, heliX cyto, ប្រព័ន្ធវិភាគមន្ទីរពិសោធន៍ស្វ័យប្រវត្តិពេញលេញ, ប្រព័ន្ធវិភាគមន្ទីរពិសោធន៍ស្វ័យប្រវត្តិ, ប្រព័ន្ធវិភាគមន្ទីរពិសោធន៍, ប្រព័ន្ធវិភាគ, ប្រព័ន្ធ

ឯកសារយោង

ទុកមតិយោបល់

អាសយដ្ឋានអ៊ីមែលរបស់អ្នកនឹងមិនត្រូវបានផ្សព្វផ្សាយទេ។ វាលដែលត្រូវការត្រូវបានសម្គាល់ *