Cellaca MX High Throughput Automated Cell Counter

Sulod sa Shipping Container

• Instrumento sa Cellaca MX
• Power Supply ug Power Cord
• USB 3.0 Connector Cable
• Laptop nga gihatag sa Nexcelom nga adunay Matrix Software (pre-installed)
• Cellaca MX User Manual (PDF file sa laptop)
• Matrix Software User Manual (PDF file sa laptop)
• Cellaca MX Quick Start Guide (PDF file sa Laptop - kini nga dokumento)
• Cellaca MX Plate Loading Template − Graphic sheet nga nagpakita sa pagsagol/loading nga mga atabay para sa 12×2 ug 8×3 plate layouts
• Giya sa Focus − Graphic sheet aron makatabang sa pag-adjust sa focus sa instrumento
• Nexcelom Counting Plates (24-well, 12×2 nga layout)
• AO/PI Viability Reagent
• Mga Fluorescent Beads

Pag-unbox sa Instrumento

Unpack ug biswal inspeksyon sa Cellaca MX sa pagsiguro nga walay kadaot nga nahitabo sa panahon sa pagpadala. Alang sa tabang sa pagpahimutang sa instrumento, bisitaha ang panid sa Cellaca MX sa among  website, i-klik ang tab nga Mga Kapanguhaan ug i-scroll down aron makit-an ang mga video sa pagbansay sa pag-unbox ug pagsugod. Samtang ang instrumento sa Cellometer MX gipadagan gamit ang Matrix Software, ang logo nagpalahi niini gikan sa naunang mga bersyon.

Pagpangandam sa Site

Ang instrumento kinahanglang ibutang sa patag nga nawong ug direktang isaksak sa surge protector (girekomendar) o power outlet. Siguruha nga ang tanan nga mga kable wala’y mga tangles sa wala pa magsugod ang Cellaca MX.
Sunda ang tanan nga mga protocol sa kaluwasan sa kagamitan ug hupti nga limpyo ang palibot sa instrument sa panahon ug pagkahuman sa operasyon. Ayaw ibutang ang device aron lisud ang pagdiskonekta gikan sa power main.

Pag-set up sa Sistema
Ang Cellaca MX System gilangkoban sa instrumento nga konektado pinaagi sa USB cable ngadto sa Operating Computer nga gigamit sa pagpadagan sa Matrix software. Ang Operating Computer mahimong ma-link sa usa ka network alang sa pag-access sa gawas files, mga tig-imprenta ug alang sa pagtipig sa mga resulta sa ihap.
Ingon nga ang Operating Computer nga gihatag sa Nexcelom usa ka touch-screen device, mahimo ka nga direktang makig-interact sa Matrix software GUI pinaagi sa hinay nga pag-tap sa mga elemento sa screen (pananglitan, mga tab, drop-down o butones) gamit ang tudlo o stylus. Kung gipili nimo nga gamiton ang pag-andar sa touch-screen, ang termino nga "pag-klik" nga makita niini nga giya mahimong pulihan sa "tap" nga gibaylo. Isip alternatibo, ang USB mouse mahimo usab nga konektado.
Ikonektar ang Power Supply/Power Cord sa instrumento ug isaksak ang Power Cord sa outlet sa kuryente. Ikonektar ang Cellaca sa Laptop nga gihatag sa Nexcelom gamit ang USB 3.0 Connector Cable. I-turn ang instrument Power Switch sa ON nga posisyon ug kumpirmahi nga ang light bar nga makita sa atubangan gisiga.
Gikan sa desktop sa Operating Computer, i-double click ang Matrix icon aron ilunsad ang software. Ang instrumento modagan sa usa ka han-ay sa pagsugod nga naglakip sa pagkonektar sa database ug pagsugod sa mga calibration.
I-klik ang icon nga nahimutang sa taas nga tuo nga suok sa screen aron makumpirma nga ang teksto sa dialog box nga gipakita nagpakita nga ang instrumento ug ang camera konektado. I-klik pag-usab ang icon aron isira ang dialog box.

Pag-calibrate sa Imong Instrumento
Pagkahuman sa inisyal nga pag-setup sa usa ka instrumento, kinahanglan nimo nga i-calibrate kini gamit ang Matrix software sa wala pa ang una nga paggamit. Ang proseso sa pag-calibrate nagkinahanglan og hulagway sa background nga gamiton aron ma-normalize ang cell counter alang sa matag na-install nga pares sa filter nga walay usa ka consumable counting plate nga gikarga sa instrumento. Kontaka ang Suporta sa Nexcelom alang sa tabang.

Mga Elemento sa Matrix Screen

Sa paglansad sa Matrix Software gipresentar ka sa tab nga Acquire> Setup screen nga default. Ang sukaranan nga mga elemento sa screen gihulagway sa ubos.
Mubo nga sulat: Kung ang Matrix 21 CFR Part 11 nga module na-enable na para sa imong sistema, ang mga user kinahanglang mag-log in sa dili pa sila makasugod sa paggamit sa software.
Ang Header Bar nga makita sa ibabaw nga bahin sa screen adunay mga butones nga Eject/Load sa plate nga nagkontrol sa paglihok sa mga instrumento.tage (alang sa pagkarga ug pagdiskarga sa mga plate nga nag-ihap) ug mga icon sa status sa instrumento. Ipakita usab niini ang mga ngalan sa assay/plate samtang nagpadayon ka sa proseso sa pag-ihap.

Ang Navigation Bar nga makita sa wala nga bahin sa screen kanunay nga gipakita. Ang pag-andar nga nalangkit sa matag tab gihulagway sa ubos:

• Balay
  Nagpakita sa logo nga nagpalahi sa software gikan sa naunang mga bersyon. Naglangkob usab sa buton nga About Matrix nga nagpakita sa mga detalye sa bersyon ug impormasyon sa pagkontak sa Nexcelom.
• Pagbaton
  Nagpakita sa screen sa Proseso sa Pagkuha sa Data diin ikaw miuswag. Kay exampug, sa diha nga ang pag-klik sa Acquire tab ikaw mosulod Setup detalye ug unya Preview ang sample aron makumpirma ang focus ug fluorescent exposure.
• Data
  Nagpakita sa screen sa Proseso sa Pag-analisa sa Data diin ikaw nag-uswag. Kay exampug, sa diha nga pag-klik sa Data tab ikaw Pagpili sa usa ka scan resulta ug unya view ihap ang mga Resulta. Makahimo ka usab og Recount pinaagi sa pag-update sa mga setting sa parameter nga gigamit sa pag-analisar sa scan aron makahimo og bag-ong resulta
• Pagdumala
  Nagpakita og mga opsyon alang sa pag-customize sa mga assay, mga tipo sa cell ug mga templates sa report nga gigamit sa workflow sa pag-ihap/pag-analisa.

Mga Giya sa Solusyon sa Pagmantsa

Gamita ang mosunod nga mga giya sa pagmantsa sa pag-andam sa cell samples alang sa Cellaca MX.

Tan-awa ang Pag-evaluate sa Viability Methods sa pahina 7 para sa mga detalye kon unsaon pagpili og pamaagi sa pagmantsa base sa cell s.ample ug pinili nga tipo sa assay.

Pag-andam sa Sampmga palid

Bisan tuod ang Cellaca MX wala magkinahanglan og bisan unsang naandan nga pagsulay o pag-calibrate, ang pag-ihap sa mga beads anaa aron mapamatud-an ang pagpaandar sa instrumento. Ang Nexcelom counting beads CCBM-011-2ML girekomendar para gamiton sa Cellaca MX.
Aron sa pag-andam sample plates nga adunay sulod nga pag-ihap nga mga lubid o cell samples:

1. Gikan sa desktop sa Operating Computer, ilunsad ang Matrix software pinaagi sa pag-double click sa Matrix software icon.
2. Ibutang ang Cellaca MX Plate Loading Template sa lab bench nga ang angay nga layout nga nag-atubang ug ibutang ang counting plate sa ibabaw sa template graphic, ipa-align ang notched corners sa plate. Mahimo nimo view ug pag-ila sa mga atabay sa pagsagol/pagkarga pinaagi sa plato.
3. Balita ang pag-ihap nga solusyon sa bead o tubo nga adunay cell sampsa kinatibuk-an nga 10 ka beses. Kung mogamit ug pag-ihap sa mga lubid, vortex bead solution sulod sa 10 segundos. Ayaw vortex cell samples.
4. Kung naggamit ug bead solution o cell sample nga dili kinahanglan nga isagol, ibutang ang pipette sa 50 μL ug dayon pipette bead solution/cell samppataas ug paubos napulo ka beses (10x) aron mabungkag ang bisan unsang potensyal nga mga pungpong. Ikarga ang 50 μL nga bead solution sa Loading Well sa counting plate.
   Kung naggamit ug cell sample nga kinahanglan isagol sa dili pa ikarga, gamita ang Mixing Well of counting plate aron maandam ang sample ug unya load 50 μL sa cell sample ngadto sa Loading Well of counting plate.
   Mubo nga sulat: Ang likido mobalhin gikan sa Loading Well ngadto sa Imaging Area.
5. Gikan sa desktop sa Operating Computer, i-klik ang Eject button nga nahimutang sa ibabaw sa Acquire tab aron maablihan ang instrument stage. Ibutang ang giandam nga plato ngadto sa stage pag-amping sa pag-align sa mga notched nga mga kanto sa plato uban sa stage sumala niini (ie, well A1 anaa sa ibabaw sa wala nga suok).
6. I-klik ang Load button aron isira ang instrument stage.
7. Diha sa Setup Details area sa screen, pagsulod sa Plate Name, pagpili og angay nga assay gikan sa drop-down ug pagsulod sa Dilution Factor.
8. Diha sa Well Details area, siguroha nga ang gipakita nga Plate Type husto, unya i-klik ang indibidwal nga mga atabay nga gigamit sa pagkarga sa s.ample.
   Sa pagpili o paghawan sa daghang mga atabay, i-klik ang usa ka atabay ug kupti ang imong mouse aron masakop ang ubang mga atabay. Aron mapili o mahawan ang tanang atabay, i-klik ang buton.
9. I-klik ang Preview buton sa view ang sample.

Mubo nga sulat: Ang mga konsentrasyon sa selula nga 1.0 x 105 − 1.0 x 107 nga mga selula/mL mahimong masusi sa Cellaca MX, nga adunay konsentrasyon nga 1.0 x 106 nga mga selula/mL nga labing maayo. Ayaw pag-uyog o vortex ang sample tungod kay kini makadaot sa mga membrana sa selula.

Pagpahigayon sa Image Clipping Check

1. I-klik ang Acquire tab ug pilia ang Brightfield Channel Verification assay.
2. Pagpili og atabay sa usa ka suok sa plato ug i-klik ang Preview butones.
3. Biswal nga pamatud-i nga walay clipping nga nahitabo sa palibot sa mga ngilit.
4. Balika kini nga lakang alang sa mga atabay sa nahabilin nga mga suok sa plato.

Pagsabot sa Instrumento Focus
Ang buhi nga mga selula kinahanglan adunay usa ka hayag nga sentro ug ngitngit, presko nga tin-aw nga gihubit nga mga ngilit.

Pag-ihap ug Pag-analisar sa Workflow

Ang paghimo sa usa ka cell count naglangkob sa Pagsulod sa Mga Detalye sa Setup ug Previewsa Sample Image sa wala pa ang Reviewsa Pag-ihap sa mga Resulta. Sa paglansad sa Matrix software, ang Acquire tab > Setup screen gipakita pinaagi sa default.

1. Tab sa Panimalay – Nagpakita sa Home screen nga adunay mga detalye sa instrumento/software.
2. Pagkuha Tab - Gamita sa pagsulod sa Setup Details ug Preview ang sampang imahe.
3. Tab sa Data - Gamit sa view kasamtangan nga mga pag-scan/pilia ang na-save nga mga scan para sa pag-analisa pag-usab.
4. Pagdumala sa Tab - Nagpakita sa Assay, Cell Type ug Report Template nga mga librarya.
5. Butang sa Pagpagawas - Instrumento sa pagkontrol stage (mag-toggle tali sa Eject/Load).
6. Mga Detalye sa Setup - Gamita sa pagsulod sa ngalan sa plato, pagpili og usa ka assay, pagdugang og a tag (sa pag-grupo sa mga resulta sa pag-scan alang sa naandan nga pagtaho) ug dilution factor.
7. Mga Detalye - Gamita sa pagsulod sa plate type.
8. Maayo nga Pagpili - Nagpakita ug plate map para gamiton sa pagpili sa mga atabay.
9. Mga Ngalan - Gamita sa paghubit sa mga ngalan sa atabay alang sa pinili nga mga atabay.
10. Lugar sa Auto Export - Gamita aron mahibal-an ang lokasyon ug mga kapilian sa pag-eksport sa awto.
11. Si Preview Butang- Kung ang plato gikarga ug ang mga detalye sa Setup gisulod, nagpakita sa sample sa Preview mode sa pag-adjust sa focus ug fluorescence signal.

Pagsulod sa mga Detalye sa Setup

1. Sa Acquire tab, Setup screen, pagsulod sa ngalan sa plate ug pagpili og assay. Kung dili ka mosulod sa ngalan sa plato, petsa/oras stamp gidugang sa “Bag-ong Sample" default (pananglitan, Bag-ong Sample 2021/03/01-11:58:09).
2. Pilia ang tipo sa plate (pananglitan, 12 × 2 o 8 × 3 nga mga format) ug i-klik ang gikarga nga mga atabay sa plate map. Aron makapili ug mga atabay nga tagsa-tagsa, i-klik ang matag atabay aron mapili o tangtangon ang pagpili niini sumala niana. Aron makapili og grupo sa mga atabay, i-klik ang atabay sa sinugdanan sa grupo ug kupti ang mouse button paubos samtang giguyod ang imong mouse ngadto sa katapusan sa grupo sa dili pa kini buhian. Aron mapili o tangtangon ang pagpili sa tanang atabay, i-klik ang All Wells icon.
3. Kung gusto, isulod ang mga kapilian sa Auto Export lakip ang default nga lokasyon ug imahe sa pag-eksport file mga tipo alang sa awtomatik nga pagtipig sa mga resulta sa pag-scan.
4. I-klik ang Preview butones.

Si Previewsa Live nga mga Imahe
Ang Preview screen nagpakita sa buhi nga mga hulagway alang sa pinili nga mga atabay. Ang kasamtangan nga Zoom magnification gipakita sa ubos nga tuo nga suok sa viewsa pane.

1. Sa Wells nga lugar, i-klik ang gipasiugda nga mga atabay sa view buhi nga mga hulagway sa samples sa plato. Sa imong paglihok gikan sa atabay ngadto sa atabay, ang buhi nga hulagway nga gipakita mausab kada pinili nga atabay (ie, nga gipakita sa plate map pinaagi sa outline nga naglibot sa atabay). Aron mag-zoom in ug out sa imahe, i-turn ang scroll wheel sa imong mouse o, kung naggamit sa touch screen, gamita ang universal nga mga lihok (pananglitan, hikapa ang tunga sa imahe gamit ang duha ka tudlo ug dayon hinayhinay nga ibuklad kini aron mag-zoom in ug balihon. kini nga aksyon sa pag-zoom out.) Ang kasamtangan nga Zoom magnification gipakita sa ubos sa tuo nga suok sa viewsa pane. Aron makalihok-lihok sa usa ka hulagway, i-klik kausa sulod sa viewsa pane ug kupti ang imong buton sa mouse samtang gi-drag ang imahe sa usa ka bag-ong lokasyon.
2. Sa Preview lugar, ang mga channel nga gipakita alang sa viewing (eg, Channel 1|Brightfield ug Channel 1|Fluorescent, ug Channel 2| Brightfield ug Channel 2|Fluorescent) magdepende sa configuration sa imong instrument ug Imaging Mode sa assay. Ang Channel 1| Ang hulagway sa Brightfield gipakita pinaagi sa default sama sa gipakita sa ubos.
3. Sa view uban pang anaa nga mga channel (ie, channel display gibase sa pinili nga assay), i-klik ang FL buttons sumala niana. Kay example, sample Channel 1|FL ug Channel 2|FL mga hulagway gipakita sa ubos.
4. I-adjust ang focus para sa brightfield nga hulagway ug verify sa fluorescent exposure.
   Mubo nga sulat: Kung ang usa ka fluorescent nga imahe magamit alang sa Channel 1, gamita ang BR 1 nga imahe aron i-adjust ang focus sa instrumento ug dayon pilia ang FL 1 nga imahe aron makumpirma ang pagkaladlad. Kung ang usa ka fluorescent nga imahe magamit alang sa Channel 2, kinahanglan nimo nga kumpirmahon ang pagkaladlad sa fluorescent. Hinumdumi nga adunay gamay nga offset tali sa BR 1 ug BR 2 nga mga imahe tungod sa gilay-on nga pagbiyahe sa camera taliwala sa duha nga set sa filter.
   Aron ma-adjust ang focus sa live image nga previewed, gamita ang Focus Controls sama sa gipakita sa mosunod nga lamesa. Ang pag-angkon og maayo nga focus mao ang yawe sa pagsiguro sa tukma nga mga ihap sa cell.
   • Auto Focus
     Gitugotan ang instrumento sa pagtino sa labing maayo nga focal position alang sa pinili nga atabay.
   • Posisyon
     Gitugotan ang mga tiggamit sa pagsulod sa usa ka numerical value alang sa bertikal (Z) nga posisyon sa tumong nga lente.
   • Maayo nga Focus Manual Offset
     Gitugotan ang mga tiggamit sa maayong pag-adjust sa bertikal (Z) nga posisyon sa tumong nga lente alang sa labing maayo nga pagtutok (sa μm). I-klik ang up/down single arrow aron i-adjust ang focus.
   • Coarse Focus Manual Offset
     Gitugotan ang mga tiggamit sa pag-adjust sa bertikal (Z) nga posisyon sa tumong nga lente alang sa labing maayo nga pagtutok (sa μm). I-klik ang up/down double arrow aron i-adjust ang focus.
5. I-klik ang Ihap nga buton.

Reviewsa Pag-ihap sa mga Resulta
Ingon nga ang sistema nakakuha sampAng mga hulagway, ang mga kolor nga gigamit sa pagmarka sa pinili nga mga atabay nagbag-o aron ipakita ang kahimtang sa atabay (ie, gikan sa Pinili ngadto sa Nakuha ngadto sa Giihap) sama sa gipakita sa leyenda nga gipakita ubos sa plate map. Sa diha nga ang usa ka atabay maihap, mahimo nimong i-klik kana nga atabay aron ipakita ang mga resulta niini ubos sa viewsa pane. Ang mga resulta sa pag-ihap gipakita sa atabay View tab gamit ang gi-assign nga Display report template. Ang dugang nga mga tab mahimong magamit alang sa resulta sa pag-scan (pananglitan, Summary ug .csv tabs alang sa Matrix v4.0; All Wells tab para sa v3.0). Ang mga resulta sa pag-ihap ipakita, i-print ug i-export base sa mga opsyon sa Pagreport nga gihubit alang sa assay.

Kanus-a viewsa mga resulta sa pag-ihap, usa ka hulagway ang gipakita nga nagrepresentar sa sample sa gilatid nga maayo. Pag-klik sa ubang gipasiugda nga mga atabay aron view kanila.

1. Sa Wells nga lugar, i-klik ang atabay aron ipakita ang imahe niini sa viewsa pane.
2. Sa ibabaw sa atabay View tab, i-klik ang brightfield (BR), Fluorescence (FL1) o Dual Fluorescence buttons (FL2) aron usbon ang presentasyon sa hulagway. Channel views gisapawan sa ibabaw sa usag usa.
3. I-klik ang Zoom button aron ma-enable/disable ang pagpakita sa kasamtangang Zoom magnification sa ubos sa tuo nga suok sa viewsa pane.
4. I-klik ang Counted nga buton aron ipakita/tago ang usa ka graphic overlay nga nagpasiugda sa Counted cells pinaagi sa pagliyok niini sa color-coded outlines (pananglitan, Berde para sa giihap/buhi nga mga selula, Pula para sa patay nga mga selula ug Yellow alang sa mga selula nga wala maihap tungod kay sila mas dako kay sa gitakda diametro sa selula).
5. Sa ubos sa atabay View tab kay usa ka report nga adunay mga detalye sa lebel nga maayo para sa sample larawan sa pinili nga atabay.
6. I-klik ang Summary tab (gipakita para sa Matrix v4.0 assay) o All Wells tab (gipakita para sa v3.0 assay) aron view usa ka bug-os nga panid nga adunay sulud nga mga resulta sa pag-ihap alang sa tanan nga gipili nga mga atabay.

Pag-eksport/Pag-imprinta sa Data sa Resulta sa Scan
Aron ma-update ang mga kapilian sa pag-eksport alang sa resulta sa pag-scan files (Ang mga opsyon sa Auto Export mahimong ma-define sa Setup Screen) ingon man ang custom nga report files, i-klik ang Export button nga nahimutang sa ubos sa Resulta screen.

1. Kumpirma ang kasamtangan nga lokasyon sa pag-eksport. I-klik ang Browse, navigate sa usa ka folder sa imong Operating Computer o network ug i-klik OK.
2. Pilia ang resulta sa pag-scan files (eg, Raw Images, Colorized Images, Data Set) nga i-eksport. Ang mga set sa datos naglangkob sa tanang mga hulagway, mga resulta, mga pagsusi, mga tipo sa selula ug mga templates sa report nga may kalabutan sa resulta sa pag-scan ug gitipigan isip .SCANRESULT files.
3. Para sa mga report, pilia file matang (ie, Excel, CSV, PDF, Pulong) nga i-eksport ug kon files kinahanglan nga awtomatikong ablihan/imprenta sa export.
4. I-klik ang Export ug Print button.

Viewsa Data Tab
Ang tab nga Data naglangkob sa Select, Results ug Recount nga mga screen nga kinahanglan makompleto sa pagkasunod-sunod sa pag-analisar sa mga resulta sa pag-scan (pananglitan, kinahanglan ka magpili usa ka resulta sa pag-scan sa dili pa nimo mahimo. view ang datos niini ug dayon i-fine-tune ang assay/cell type parameter settings sa dili ka pa makahimo og recount).

Aron maablihan ang usa ka resulta sa pag-scan nga anaa sa Lista sa mga Resulta sa Select screen mahimo nimong i-double click ang resulta, o i-klik kini kausa (aron i-highlight kini sa lista) ug dayon i-klik ang View butones. Sa higayon nga ang resulta sa pag-scan mapakita mahimo nimong analisahon ang datos pinaagi sa pag-klik sa mga channel ug pag-usab-usab sa presentasyon sa mga hulagway nga gipakita. Aron ma-fine-tune ang mga setting sa parameter sa assay, i-klik ang Recount button. Kung gikinahanglan ang pagpili og laing resulta sa pag-scan samtang anaa ka sa Resulta nga screen, i-klik ang Pagpili nga opsyon sa Navigation Bar aron makapili og laing resulta sa pag-scan. Aron ma-fine-tune ang mga parameter sa assay para sa resulta sa scan, mahimo nimong i-klik ang View buton para sa Last Used assay o pinili nga bag-ong assay, ug usba ang mga parameter niini kung gikinahanglan. Aron mahimo ang usa ka recount, i-klik ang Recount button. Samtang nag-navigate ka sa matag screen, ang Navigation Bar awtomatik nga gi-update aron ipakita ang imong pag-uswag. Human mapahigayon ang usa ka recount, ang Navigation Bar mobalik sa Data tab > Results screen.

Viewsa Manage Tab
Ang Manage tab naglista sa tanang Assays, Cell Types ug Report Templates nga gikarga sa imong system. Gikan sa kini nga screen mahimo nimong i-import / i-export, usbon ang ngalan, i-delete o ipakita / itago ang bisan unsang mga entidad sa ilang mga lista.

Ang kolum sa Estado nagpakita sa mga icon nga nagpaila sa kasamtangan nga kahimtang sa usa ka entidad nga nagpakita kung sila Naka-lock, Na-unlock o usa ka default sa Nexcelom System. Bisan tuod ang usa ka locked/system assay, cell type o report template dili ma-edit, mahimo nimo kining pilion nga gamiton isip tinubdan sa pagmugna og bag-ong entidad ug i-klik ang Save As button aron i-save kini gamit ang bag-ong ngalan.

Naghatag ang Nexcelom og halapad nga assay, tipo sa cell ug mga librarya sa template sa pagreport ingon mga default sa software sa Matrix. Kung gusto nimo og tabang sa paghimo og bag-ong assay, pag-customize sa mga setting sa parameter sa cell type para sa usa ka assay, o paghimo og bag-ong tipo sa cell, ipadala ang natipig nga hilaw nga mga imahe sa Suporta sa Nexcelom ug among i-optimize ang usa ka custom nga assay/type sa cell para kanimo. Para sa tabang sa pag-customize sa mga templates sa report, ipaambit kanamo ang tumong nga imong gipaningkamutan nga matuman ug maghimo kami og bag-ong template aron ma-accommodate ang imong mga panginahanglan.
Para sa kompletong listahan sa anaa nga mga assay, tipo sa selula ug mga templates sa report, kontaka ang Suporta sa Nexcelom.

Pag-evaluate sa mga Pamaagi sa Viability

Kung gitimbang-timbang ang mga pamaagi sa pagkaayo, hinungdanon nga mogamit usa ka aliquot gikan sa kultura sa stock cell aron mahimo ang tanan nga pagsulay. Ang cell sampAng kinahanglan nga susihon alang sa konsentrasyon sa Auto 2000 sa wala pa ang pagmantsa.
Kung itandi ang Trypan Blue ug AO/PI nga mga pamaagi, usa ka bahin sa sample kinahanglan nga namansahan sa trypan blue ug laing bahin nga namansahan sa AO/PI.

Paggamit sa Trypan Blue Viability Method
Ang Brightfield imaging nga gigamit kauban sa Trypan Blue Viability mahimong magamit aron mahibal-an ang gidaghanon, konsentrasyon ug porsyento.tage sa buhi nga mga selula alang sa mga linya sa selula ug mga nag-unang mga selula sa kultura. Ang Brightfield imaging nga adunay trypan blue dili girekomendar para sa samples nga adunay mga debris, platelet o pula nga mga selyula sa dugo ingon nga fluorescence gikinahanglan aron tukma nga magkalainlain ang mga nucleated cell.
Pag-andam sa Cell Sample para sa Trypan Blue Viability Determination
Ang mga konsentrasyon sa selula nga 1.0 x 105 − 1.0 x 107 nga mga selula/mL mahimong masusi sa Cellaca MX, nga adunay konsentrasyon nga 1.0 x 106 nga mga selula/mL nga labing maayo.
Balita ang tubo nga adunay sulod nga mga selula sa napulo ka beses (10x) ug pipette pataas ug paubos 10x aron makamugna og homogenous cell sample ug pagpakunhod sa cell clumps. Ayaw pag-uyog o vortex ang sample tungod kay kini makadaot sa mga membrana sa selula.
Para sa pagsukod sa viability, mantsa ang mga selula pinaagi sa paghiusa sa 50 μL sa cell sample nga adunay 50 μL sa usa ka 0.2% nga trypan blue nga solusyon sa pagmantsa (alang sa katapusang konsentrasyon nga 0.1% nga trypan blue). Hinay-hinay nga sagol pinaagi sa pipetting pataas ug paubos 10x.

Paggamit sa AO/PI Viability
Ang mga pamaagi sa dual-fluorescence naugmad aron tukma nga mahibal-an ang konsentrasyon sa nucleated nga cell ug pagkaayo sa panguna nga mga selulaamples nga adunay mga debris ug non-nucleated nga mga selula, lakip ang mga platelet ug pula nga mga selula sa dugo.
Sa AO/PI viability method, ang acridine orange (AO) mosulod sa tanang mga selula ug momantsa sa ilang DNA hinungdan nga ang mga nucleated cell nga mag-fluoresce Green, samtang ang propidium iodide (PI) mosulod lamang sa mga patay nga selula nga adunay kompromiso nga mga lamad ug mantsa sa ilang DNA hinungdan sa mga patay nga nucleated cells nga mag-fluoresce. Pula.

• Ang mga selula nga namansahan sa AO ug PI nag-fluoresce nga Pula tungod sa pagpalong.
• Ang buhi nga nucleated nga mga selula daling mailhan sa Green FL channel.
• Ang mga patay nga nucleated cells dali nga mailhan sa Red FL channel.

Ingon usa ka sangputanan, wala’y pagpanghilabot gikan sa mga tinumpag ug dili nucleated nga mga selyula kung gigamit ang pamaagi sa pagkaayo sa AO / PI.

Pag-andam sa Cell Sample para sa AO/PI Viability Determination
Ang mga konsentrasyon sa selula nga 1.0 x 105 − 1.0 x 107 nga mga selula/mL mahimong masusi sa Cellaca MX, nga adunay konsentrasyon nga 1.0 x 106 nga mga selula/mL nga labing maayo.
Dilution o konsentrasyon sa usa ka cell sample mahimong gikinahanglan base sa inisyal nga konsentrasyon.
Balita ang tubo nga adunay sulod nga mga selula sa napulo ka beses (10x) ug pipette pataas ug paubos 10x aron makamugna og homogenous cell sample ug pagpakunhod sa cell clumps. Ang pag-vortex mahimong makatabang sa pipila ka mga samples, apan mahimong makamugna og mga bula nga makapalisud sa pag-pipette kon magtrabaho uban sa gagmay nga mga sampmga volume.
Kung gikinahanglan, dilute ang orihinal nga sampuban sa PBS. Mamantsa ang mga selula pinaagi sa paghiusa sa 50 μL sa mga selulaample uban sa 50 μL sa AO / PI pagmantsa solusyon. Para sa tibuok dugo ug uban pang viscous samples, pagdibuho sampisulod ug pagawas ang tumoy sa pipette sa dili pa ibalhin. Hinay-hinay nga isagol pinaagi sa pag-pipet up ug down 10x sa dili pa idugang ang sample sa pag-ihap sa mga atabay sa plato.
Ang lamesa sa ubos nagpakita sa girekomendar nga pagtunaw sa dihang nag-andam sa cell samples alang sa AO/PI viability analysis ug ang kataposang Dilution Factor nga mosulod sa Matrix software para sa lain-laing mga s.ampmga tipo.

Pagkontak sa Suporta sa Nexcelom

Ang Suporta sa Nexcelom magamit gikan sa 8:30 am hangtod 5:30 pm EST ug mahimong maabot sa +1 978-327-5340 o pinaagi sa pagpadala sa email: support@nexcelom.com
Ang nabansay nga mga espesyalista anaa aron sa pagtabang sa imong team sa sampAng pag-analisar ug pag-optimize sa assay / cell type imaging parameters.
Tan-awa ang mosunod nga dokumentasyon para sa dugang impormasyon sa instrumento:

• 8002958 Cellaca MX User Manual para sa operasyon sa instrumento, pag-atiman ug mga detalye sa pagmentinar (anaa isip PDF sa desktop sa Laptop nga gihatag sa Nexcelom nga gipadala uban sa imong instrumento).
• 8003394 Matrix Software User Manual para sa kompletong detalye sa paggamit sa software functionality (anaa isip PDF sa desktop sa Nexcelom-provided Laptop nga gipadala uban sa imong instrumento).
• 8002845 Cellaca MX Focus Guide alang sa tabang sa labing maayo nga pagtutok.

© 2022 Nexcelom Bioscience

Mga Dokumento / Mga Kapanguhaan

Cellaca MX High Throughput Automated Cell Counter [pdf] Giya sa Gumagamit MX High Throughput Automated Cell Counter, MX, High Throughput Automated Cell Counter, Automated Cell Counter, Automated Counter, Cell Counter, Counter

Mga pakisayran

• Manwal sa Gumagamit